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① 组织块培养法

组织块培养是常用
、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞
、淋巴细胞、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性
，可用于重点观察细胞间的联系
、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：人牙周膜干细胞

英文名称：Human Periodontal Ligament Stem Cells

组织来源
：牙周膜组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

人牙周膜干分离自牙周膜组织；牙周膜（牙周韧带
、牙周间隙）是由致密结缔组织所构成。多数纤维排列成束，纤维的一端埋于牙骨质内，另一端则埋于牙槽窝骨壁里，使牙齿固位于牙槽窝内；牙周膜内有神经、血管、淋巴和上皮细胞等。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。间充质干细胞（mesenchymal stem cells
，MSCs）来源于胚胎时期的中胚层组织，具有很强的自我复制和多向分化潜能
，具有向脂肪细胞、成骨细胞
、软骨细胞及肌细胞等多种终末细胞定向分化的能力，运用 MSCs来修复软骨损伤具有很好的应用前景，目前已能够从骨髓、脂肪
、滑膜、骨骼、肌肉等组织以及羊水
、脐带、脐带血中分离和制备间充质干细胞。牙周膜干细胞参与了牙周组织的病变
、修复及再生过程。现在，利用牙周膜干细胞建立体外模型，已经成为有关员研究牙周组织疾病的重要手段


。

公司实验室分离的人牙周膜干采用胶原酶消化结合差速贴壁法制备而来
，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的人牙周膜干经CD44免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV
、HCV、支原体
、细菌、酵母和真菌等。

培养基 含FBS
、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3-5代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气
，95%
；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖

，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料

，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动
，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后
，细胞容易贴壁生长。

小鼠神经营养素4(mouse -4)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠(mouse NO)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠骨保护素(mouse OPG)   作用：   ELISA   规格
：      进口分装

小鼠骨桥素(mouse OPN)   作用
：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat maix metalloproteinase 2/ gelatinase A (MMP-2/Gelatinase A) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)试剂盒

HumanNeuronalChemorepelleSlit2ELISAKit 人神经生长导向因子Slit2试剂盒 96T/48T 进口分装

DuckIerleukin2,IL-2试剂盒鸭白介素2(IL-2)试剂盒规格

：96T/48T

枣椰树(datepalm)培养基500毫升溶液/片剂

MouseDehydroepiandrosterone,DHEAELISAKit小鼠脱氢表雄同(DHEA)试剂盒规格：96T/48T

CA10重组人 Carbonic Anhydrase X / CA10 蛋白 Protein

颗粒酶H(GZMH)重组蛋白 Recombinant Granzyme H (GZMH)

VTI1A重组人 VTI1A 蛋白 Protein

CLEC4D Protein Human 重组人 CLEC4D / CLECSF8 蛋白

HA Protein H1N1 重组甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

颗粒酶H(GZMH)重组蛋白 Recombinant Granzyme H (GZMH)

CLEC4D Protein Human 重组人 CLEC4D / CLECSF8 蛋白

CA10重组人 Carbonic Anhydrase X / CA10 蛋白 Protein

HA Protein H1N1 重组甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

VTI1A重组人 VTI1A 蛋白 Protein

人牙周膜干细胞大鼠热休克转录因子1(HSF1)试剂盒 ，英文名： HSF1 ELISA Kit

Mouse vascular endothelial cell growth factor C (VEGF-C) ELISA Kit 小鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)试剂盒

RatAquaporin3,AQP-3ELISAKit 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforGuineapigierleukin4,IL-4ELISAKit豚鼠白介素4

细胞长链脂酰脱氢酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量试剂盒20次

Rattyrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains2,Tie-2ELISAKit大鼠含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪激酶2(Tie-2)试剂盒规格：96T/48T

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的
，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用