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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁

，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞
、淋巴细胞
、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养

，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系
、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：人脉络膜血管内皮细胞

英文名称：Human Choroidal Vascular Endothelial Cells

组织来源
：脉络膜组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

人脉络膜血管内皮分离自眼球脉络膜组织
；脉络膜在视网膜和巩膜之间，含有丰富血管和色素细胞
，对外力冲击的耐受性较视网膜差
，当眼球受到从前面来的外力的冲击作用通过玻璃体传到后极部时
，坚硬的巩膜在其外面又有抵抗作用，使脉络膜在内外两种作用夹攻下而发生破裂和出血
。脉络膜呈暗褐色

，围绕视神经乳头部有照膜，为青绿色带金属光泽的三角形区
。脉络膜是眼球中膜的后2/3处的薄膜
，由纤维组织、小血管和毛细血管组成
，软而薄，棕红色，在巩膜和视网膜之间，续连于睫状体后方。脉络膜的血循环营养视网膜外层，其含有的丰富色素起遮光暗房作用。主要功能是营养视网膜外层及玻璃体，并有遮光作用
，使反射的物象清楚。同时对视觉系统起保护作用
，对整个视觉神经有调节作用。续连于睫状体后方，含丰富的血管和色素细胞，有营养和遮光作用
。

公司实验室分离的人脉络膜血管内皮采用胶原酶-混合消化法并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的人脉络膜血管内皮经CD31免疫荧光鉴定

，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV
、HCV
、支原体
、细菌、酵母和真菌等。

包被条件 PLL（0.1mg/ml）
，明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气
，95%；CO2
，5%

取材→分离→培养和维持

1
、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2
、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖

，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水
、胸水或腹水的悬液材料
，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料

，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散
，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大
，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织
。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动
，使团块膨松
，由块状变成絮状
，此时再采用机械法
，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长
。

大鼠抗酸性0酸酶(ACP5)检测试剂盒 
，英文名： ACP5 ELISA Kit

Monkey glial fibrillary acidic protein (GFAP) ELISA Kit神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)检测试剂盒

RaeninELISAKit 大鼠肾素(Renin)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforFree-T3(MouseFreei-iodothyronineIndes)ELISAKit小鼠游离三甲状腺原

细胞活化10(FACTORXa)活性比色法定量检测试剂盒20次

Ratplaceagrowthfactor,PLGFELISAKit大鼠胎盘生长因子(PLGF)检测试剂盒规格：96T/48T

S100B重组小鼠 S100B / S100beta 蛋白 (Fc 标签) Protein

端粒酶关联蛋白1(TEP1)重组蛋白 Recombinant Telomerase Associated Protein 1 (TEP1)

DDR2重组人 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 Protein

IGJ Protein Human 重组人 IGJ / Immunoglobulin J chain 蛋白

IL17RA Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL17RA / IL17R 蛋白 (Fc 标签)

白蛋白(ALB)天然蛋白 Native Albumin (ALB)

IGJ Protein Human 重组人 IGJ / Immunoglobulin J chain 蛋白

TCN2重组小鼠 TCN2 / Transcobalamin-II 蛋白 Protein

IFNA1 Protein Rat 重组大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (Fc 标签)

B3GNT2重组人 B3GNT2 蛋白 (Fc 标签) Protein

豚鼠血清(NO)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat signal ansduction molecule 1 (Smad1) ELISA Kit 大鼠信号转导分子1(Smad1)检测试剂盒

Humanendomorphin-2,EM-2ELISAKit 人内肽-2(EM-2)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanCryoglobulin,CG检测试剂盒人冷球蛋白(CG)检测试剂盒规格
：96T/48T

组织D-乳酸比色法定量检测试剂盒20次

humanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKit人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)检测试剂盒规格：96T/48T

人脉络膜血管内皮细胞嗜酸性粒细胞趋化因子 (Eotaxin)   作用
：   ELISA   规格
：   96T   美国 Biosesource

Human Eotaxin-2/MPIF-2/CCL24   作用：   ELISA   规格
：   96T   美国 R&D

Human Eotaxin-3/CCL26   作用
：   ELISA   规格：   96T   美国 R&D

促红细胞生成素 (EPO)   作用
：   ELISA   规格
：   96T   德国 DRG

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的
，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用