242net必赢

产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断
商品属性
：

产品英文名称：Caspase-4 Assay Kit (Colorimetric)

产品中文名称：Caspase-4 活性分析试剂盒（比色法）

规格
：20T/50T/100T

货号：EY-01X8537
用途
：仅供科研研究实验

特点&优势:

•  简单
，优化的实验方法
。

•  操作方便快捷。

•  检测早/中期的细胞凋亡。

保存建议:请参阅说明书中各个组件的存储条件
，自发货之日起，按照推荐的保存条件
，有效期为12个月。

运输条件:蓝冰运输

背景

Caspase全称为含半的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase)
。caspase是一类蛋白酶家族
，成员较多，在人类
，已经鉴定了11种不同的caspase，根据其蛋白酶序列的同源性可分为3个亚族

：Caspase-1亚族包括 Caspase-1
、4
、5、11
；Caspase-2亚族包括Caspase-2

、9； Caspase-3亚族包括Caspase-3
、6
、7
、8、10。起细胞凋亡执行者作用的是caspase3,6,7。

本产品具有下列特点:

 1.操作简便
、快捷

。可直接加入到检测平板
。在96-孔板中检测时,无需洗涤或收获细胞,免去溶解步骤。

2. 无放射性
。不需要配制液闪混合物,也不需要处理废弃物
。

3. 与MTT相比,使用更安全。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物
。

4. 操作灵活,与MTT不同,平板读数后可放回温箱继续孵育,使颜色进一步生成。

操作步骤：

(一)获得目的基因

1
、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。

2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。

(二)构建重组表达载体

1
、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段
。

2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。

(三)  获得含重组表达质粒的表达菌种

1、 将连接产物转化大肠杆菌DH5α,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。

2、 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作
。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点
。

3
、 以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞
。

(四)诱导表达

1、挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。

2
、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)
。

3

、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr
。

4、分别取菌体1ml, 离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀, 70℃10min

。

5、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析。

公司正在出售的产品：

ⅣD组0脂酶A2(PLA2G4D)重组蛋白 Recombinant Phospholipase A2, Group IVD (PLA2G4D)

ECE2 Protein Human 重组人 ECE-2 蛋白

CD59A重组小鼠 CD59a / Protectin / MAC-IP 蛋白 Protein

IL1B Protein Rat 重组大鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (mature form)

FGF17重组人 FGF17 蛋白 Protein

小鼠抗IgE受体抗体ELISA 试剂盒 96T/48T

Human pregnancy specific beta 1 glycoprotein (SP1/PS 1-G) ELISA Kit 人特异性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)检测试剂盒

HumanDeoxypyridinolinecrosslinks,DPDELISAKit 人脱氧胶原交联(DPD)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanangiotensionIreceptorAibody,ANG-ⅠRaibody检测试剂盒人血管紧张素Ⅰ受体抗体(ANG-ⅠR)检测试剂盒规格
：96T/48T

植物合成酶活性比色法定量检测试剂盒20次

Humanβ2-Glycoprotein1AibodyIgM,β2-GP1AbIgMELISAKit人β2糖蛋白1抗体IgM(β2-GP1AbIgM)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠肝细胞生长因子受体(HGFR/c-MET)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠肝细胞生长因子(HGF)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠肝表达趋化因子(LEC)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠甘油三酯（TG）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠3-硝基酪酸(3-)检测试剂盒 ，英文名
： 3- ELISA Kit

Mouse maix metalloproteinase inhibitor 4 (TIMP-4) ELISA Kit 小鼠基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)检测试剂盒

MousemembraneIgA,mIgAELISAKit 小鼠表面膜免疫球蛋白A(mIgA)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumaecombinationactivatinggene1,RAG-1ELISAKit人重组激活基因1

通用型猪轮状病毒(Porcinerotavirus)试剂盒20次

ELISAKitBGP/Gehrelin大鼠脑肠肽

Caspase-4 活性分析试剂盒（比色法）CD59A重组小鼠 CD59a / Protectin / MAC-IP 蛋白 Protein

ⅣD组0脂酶A2(PLA2G4D)重组蛋白 Recombinant Phospholipase A2, Group IVD (PLA2G4D)

FGF17重组人 FGF17 蛋白 Protein

ECE2 Protein Human 重组人 ECE-2 蛋白

IL1B Protein Rat 重组大鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (mature form)