实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人流行性腮腺炎病毒抗体（Mumps-Ab）表达。用纯化的抗原包被微孔板 ，制成固相抗原，可与样品中流行性腮腺炎病毒抗体（Mumps-Ab）相结合 ，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色 ，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值） ，与CUTOFF值相比较，从而判定标本中流行性腮腺炎病毒抗体（Mumps-Ab）的存在与否 。
人流行性腮腺炎病毒抗体ELISA试剂盒组成
130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶
2酶标试剂6ml×1瓶8阳性对照0.5ml×1瓶
3酶标包被板12孔×8条9阴性对照0.5ml×1瓶
4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份
5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张
6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验 。若不能马上进行试验 ，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
人流行性腮腺炎病毒抗体(Mumps-Ab)ELISA试剂盒操作步骤
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl 。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部 ，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液 ：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤 ：小心揭掉封板膜，弃去液体 ，甩干 ，每孔加满洗涤液 ，静置30秒后弃去，如此重复5次 ，拍干 。
6.加酶 ：每孔加入酶标试剂50μl ，空白孔除外。
7.温育：操作同3 。
8.洗涤 ：操作同5 。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.终止 ：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色） 。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行 。
计算和结果判定：
试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00;阴性对照平均值≤0.10
临界值（CUTOFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定：样品OD值<临界值（CUTOFF）者为流行性腮腺炎病毒抗体（Mumps-Ab）阴性
阳性判定：样品OD值≥临界值（CUTOFF）者为流行性腮腺炎病毒抗体（Mumps-Ab）阳性。
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