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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法
。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁
，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞
，如白血病细胞
、淋巴细胞
、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性
，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称
：猪心脏微血管内皮细胞

英文名称：Porcine Cardiac Microvascular Endothelial Cells

组织来源：心脏

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

猪心脏微血管内皮分离自心脏组织；心脏是脊椎动物身体中重要的一个器官，主要功能是为血液流动提供压力，把血液运行至身体各个部分
。心脏由心肌构成，左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成
。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开
，故互不相通，心房与心室之间有瓣膜（房室瓣）

，这些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动，向器官、组织提供充足的血流量，以供应氧和各种营养物质，并带走代谢的终产物（如二氧化碳
、无机盐、尿素和尿酸等），使细胞维持正常的代谢和功能
。心脏微血管内皮细胞是组成心脏微血管腔面单层扁平上皮样细胞，它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力
、调节血压、抗血栓形成等有重要作用，在心脏血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义
。近年来大量研究表明
，心肌微血管内皮细胞的功能和病理改变直接影响心肌细胞功能，也是诸多毒素
、炎症因子及病毒等重要靶位，其作为体外研究的细胞模型在心肌缺血-再灌注发病机制和细胞间旁分泌细胞生长因子研究中起着重要作用
。

实验室分离的猪心脏微血管内皮采用胶原酶-混合消化法结合密度梯度离心法
、后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来
，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的猪心脏微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV、HCV、支原体
、细菌、酵母和真菌等。

包被条件
：PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基：基础培养基，含FBS、EGF、bFGF

、IGF、VEGF
、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性：可传2-3代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%
；CO2
，5%

猪心脏微血管内皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养
，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1
、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件
，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开
，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散
，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法

。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状
，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散

，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长
。

大鼠白细胞介素10(IL-10)检测试剂盒 ，英文名： IL-10 ELISA Kit

Mouse macrophage migration inhibitory factor (MIF) ELISA Kit 小鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)检测试剂盒

Mouseosteoclastdiffereiationfactor,ODFELISAKit 小鼠破骨细胞分化因子(ODF)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanNephrinELISAKit人蛋白

铜蓝蛋白活性比色法定量检测试剂盒20次

ELISAKitB7-2/sCD86大鼠可溶性白细胞分化抗原86

ICAM1重组人 ICAM-1 / CD54 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

生长分化因子9(GDF9)重组蛋白 Recombinant Growth Differentiation Factor 9 (GDF9)

CXCL1重组人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 Protein

EFNA3 Protein Human 重组人 Ephrin-A3 / EFNA3 / EFL2 蛋白 (Fc 标签)

HA Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

生长分化因子9(GDF9)重组蛋白 Recombinant Growth Differentiation Factor 9 (GDF9)

EFNA3 Protein Human 重组人 Ephrin-A3 / EFNA3 / EFL2 蛋白 (Fc 标签)

ICAM1重组人 ICAM-1 / CD54 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

HA Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

CXCL1重组人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 Protein

小鼠睫状神经营养因子(CF)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat platelet aibodies IgG/M/A (PA-IgG/M/A) ELISA Kit 大鼠抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)检测试剂盒

Humandeltasleep-inducingpeptide,DSIPELISAKit 人促睡眠肽(DSIP)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgG检测试剂盒人抗心0脂抗体IgG(ACA-IgG)检测试剂盒规格：96T/48T

植物核同糖1,5二0酸羧化/加氧酶活化酶(RUBPCase/RubiscoActivase)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次

Humanα-galactosidase,αGALELISAKit人β半乳糖苷酶(βGAL)检测试剂盒规格：96T/48T

猪心脏微血管内皮细胞小鼠低氧诱导因子检测试剂盒   小鼠低氧诱导因子试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠低氧诱导因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠低氧诱导因子试剂盒、小鼠低氧诱导因子eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠低密度脂蛋白免疫复合物检测试剂盒   小鼠低密度脂蛋白免疫复合物试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠低密度脂蛋白免疫复合物试剂盒，规格型号：96T/48T，来源
：检测试剂盒（进口分装）
，产品别名：小鼠低密度脂蛋白免疫复合物试剂盒、小鼠低密度脂蛋白免疫复合物eisa试剂盒   保存条件
：2-8℃   保质期

：6个月
。

小鼠的牛血清白蛋白残留检测检测试剂盒   小鼠的牛血清白蛋白残留检测试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠的牛血清白蛋白残留检测试剂盒
，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名
：小鼠的牛血清白蛋白残留检测试剂盒、小鼠的牛血清白蛋白残留检测eisa试剂盒   保存条件
：2-8℃   保质期：6个月
。

小鼠蛋白激酶检测试剂盒   小鼠蛋白激酶试剂盒   规格型号
：96T/48T   小鼠蛋白激酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠蛋白激酶试剂盒、小鼠蛋白激酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期
：6个月
。

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的
，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用
，非食用