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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法

。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁
，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养

。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系
、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用
。

产品名称
：小鼠羊膜胚胎细胞

英文名称：Mouse Amniotic Embryonic Cells

组织来源：胎盘组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

小鼠胚胎羊膜分离自羊膜组织
；羊膜为单层上皮细胞互相连接构成的薄膜。单层上皮细胞具有分泌羊水的作用
。随着胚胎的生长发育，羊膜与绒毛密切紧贴，形成胎膜。胎膜随着羊膜腔逐渐扩大而呈半透明的薄膜，无血管，富有韧性（胎膜也就是羊膜腔的囊壁）。羊膜腔内充满的液体为羊水。羊膜仅覆盖在胎盘的儿体面，并不深入胎盘组织中，随着妊娠的进展羊膜腔逐渐扩大

，占据整个子宫腔，羊膜是胎膜内一层
，是一层半透明的薄膜，与覆盖在胎盘、脐带的羊膜层相连接。羊膜是胎盘的内层
，与人眼结膜组织结构相似，含有眼表上皮细胞，包括结膜细胞和角膜上皮细胞生长所需要的物质，其光滑，无血管
、神经及淋巴，具有一定的弹性，厚0.02~0.5mm，在电镜下，其分为五层：上皮层、基底膜、致密层、纤维母细胞层和海绵层
，羊膜基底膜和羊膜基质层含有大量不同的胶元
，主要为i、iii、iv、v、vii型胶原和纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等成份，正是这些成份使羊膜可以充当“移植的基底膜"而发挥一种新的健康合适的基质

。羊膜细胞主要由羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞组成，均具有多分化潜能，可转化为神经元，且还有合成、释放生物活性物质和神经营养因子的功能。

公司实验室分离的小鼠羊膜胚胎采用-胶原酶联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的小鼠羊膜胚胎经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV
、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形
、多角形

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气，95%
；CO2
，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟
。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织
。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠同种异体移植症因子1(AIF1)检测试剂盒 ，英文名： AIF1 ELISA Kit

Mouse myeloperoxidase (MPO) ELISA Kit 小鼠髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒

RatInsulin,INSELISAKit 大鼠胰岛素(INS)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHO-2(Mousehemeoxygenase2)ELISAKit小鼠血红素氧合酶2

细胞PIM2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitS-100B大鼠S100B蛋白

CD27重组食蟹猴 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 标签) Protein

MAPK1/ERK3 (Mitogen-activated protein kinase 3; P44MAPK 0.5mgMAPK1/ERK3 (Mitogen-activated protein kinase 3; P44MAPK) 原活化蛋白激酶3抗原

RHOA重组人 RhoA 蛋白 Protein

DUSP3 Protein Human 重组人 DUSP3 / VHR 蛋白

GLA Protein Mouse 重组小鼠 alpha-Galactosidase A / GLA 蛋白

MAPK1/ERK3 (Mitogen-activated protein kinase 3; P44MAPK 0.5mgMAPK1/ERK3 (Mitogen-activated protein kinase 3; P44MAPK) 原活化蛋白激酶3抗原

DUSP3 Protein Human 重组人 DUSP3 / VHR 蛋白

CD27重组食蟹猴 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 标签) Protein

GLA Protein Mouse 重组小鼠 alpha-Galactosidase A / GLA 蛋白

RHOA重组人 RhoA 蛋白 Protein

小鼠抗抗体(AsAb)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human heat shock protein 70 (HSP-70) ELISA Kit 人热休克蛋白70(HSP-70)检测试剂盒

Humanmembraneattackcomplex,MACELISAKit 人膜攻击复合物(MAC)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanAngiotensinⅡReceptor2aibody,AT2R-Ab检测试剂盒人血管紧张素Ⅱ受体2抗体(AT2R-Ab)检测试剂盒规格
：96T/48T

植物甘露糖6-0酸异构酶(mannose-6-phosphateisomerase;MPI)电泳分析试剂盒5次

humanβ-tubulin,TUBBELISAKit人β-微管蛋白(TUBB)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠羊膜胚胎细胞小鼠谷酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠雌二醇受体(ER)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月
。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用