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细胞简介：

小鼠肾皮质上皮分离自肾组织

；肾脏是机体的重要器官，它的基本功能是生成尿液
，借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质
，如葡萄糖
、蛋白质
、氨基酸、钠离子
、钾离子、等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能
，生成肾素、促红细胞生成素
、活性3、前列腺素
、激肽等，又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定，使新陈代谢得以正常进行
。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠肾皮质上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来
，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的小鼠肾皮质上皮经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等
。

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS
、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

实验报告
：

一、分离与培养：

1、无菌条件下

，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s

，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化
；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清
，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养
；

5、差速贴壁1h后
，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时
，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2
、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3
、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6
、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

公司正在出售的产品：

大鼠重肽神经丝蛋白(NEFH)检测试剂盒 ，英文名： NEFH ELISA Kit

Mouse perinuclear ai neuophil cytoplasmic aibody (pANCA) ELISA Kit 小鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)检测试剂盒

MouseBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-ⅡELISAKit 小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanInsulieceptorBeta,ISR-BetaELISAKIT人胰岛素受体β

微型RNA(miRNA)扩增试剂盒20次

ELISAKitMIP-3β大鼠巨噬细胞性蛋白3β

THY1重组食蟹猴 CD90 / THY-1 蛋白 Protein

IQGAP1 支架蛋白抗原 0.5mgIQGAP1 支架蛋白抗原

DDOST重组人 DDOST / OST48 蛋白 Protein

DCBLD1 Protein Human 重组人 Discoidin / DCBLD1 蛋白

PDPN Protein Mouse 重组小鼠 Podoplanin / PDPN 蛋白

IQGAP1 支架蛋白抗原 0.5mgIQGAP1 支架蛋白抗原

DCBLD1 Protein Human 重组人 Discoidin / DCBLD1 蛋白

THY1重组食蟹猴 CD90 / THY-1 蛋白 Protein

PDPN Protein Mouse 重组小鼠 Podoplanin / PDPN 蛋白

DDOST重组人 DDOST / OST48 蛋白 Protein

小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human prostatic acid phosphatase (PAP) ELISA Kit 人前列腺酸性0酸酶(PAP)检测试剂盒

HumanleukocyteaigenG,HLA-GELISAKit 人类白细胞抗原G(HLA-G)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanadrenalcoexaibody,ACA检测试剂盒人肾上腺皮质抗体(ACA)检测试剂盒规格：96T/48T

植物a-(a-AMYLASE)活性比色法定量检测试剂盒20次

Mouseadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit小鼠能a1A受体(ADRA1A)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠肾皮质上皮细胞小鼠甲状旁腺激素(PTH)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠甲基化酶(Methylase)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠己糖激酶(HK)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好
，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息
，如细胞形态
、所用培养基

、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致

，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态
。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞

，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养

。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1
：2传代 
。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。