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① 组织块培养法

组织块培养是常用
、简便易行和成功率较高的原代培养方法

。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中
，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用
。

产品名称
：兔胰腺上皮细胞

英文名称：Rabbit Pancreatic Epithelial Cells

组织来源：胰腺

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔胰腺上皮分离自胰腺组织；胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分
。外分泌腺由腺泡和腺管组成，腺泡分泌胰液

，腺管是胰液排出的通道
。胰液中含有
、原
、脂肪酶
、
。胰液通过胰腺管排入十二指肠，有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成
，胰岛主要由4种细胞组成：α细胞
、β细胞
、γ细胞及PP细胞


。α细胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β细胞分泌胰岛素，降低血糖
；γ细胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌
；PP细胞分泌胰多肽
，抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。胰腺干细胞在发育上被认为分离自内胚层胰腺上皮，在随后的胰腺发育过程中，胰腺干细胞分化为胰岛细胞（α、β
、δ
、PP细胞）
、导管上皮细胞以及腺泡细胞。胰腺组织中还存在大量的间充质来源的细胞
，包括成纤维细胞、血管内皮细胞、血管平滑肌细胞以及星形细胞
，其中以成纤维细胞占主要部分。要离体分离培养获得胰腺上皮细胞就要排除间充质来源的细胞，尤其是成纤维细胞
。目前常用的去除成纤维细胞方法有机械刮除法
、消化以及胶原酶消化法等，胰腺上皮细胞的病变与急慢性胰腺炎的发生具有重大意义。

实验室分离的兔胰腺上皮采用胶原酶分次消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来
，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔胰腺上皮经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1
、HBV、HCV、支原体、细菌
、酵母和真菌等。

包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基：含FBS
、生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性

：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%

培养条件
：气相

：空气，95%
；CO2

，5%

兔胰腺上皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密

，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水

、胸水或腹水的悬液材料
，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层
，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散
，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法

。

① 机械分散法

特点:简便

、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动
，使团块膨松，由块状变成絮状

，此时再采用机械法
，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠肌酸激酶MB同工酶(CKMB)检测试剂盒 ，英文名： CKMB ELISA Kit

Mouse tissue polypeptide aigen (TPA) ELISA Kit 小鼠组织多肽抗原(TPA)检测试剂盒

RatCalretinin,CRELISAKit 大鼠钙结合蛋白(CR)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforFVIIIAg(MouseFactorVIII-relatedAigen)ELISAKit小鼠第八因子相关抗原

细胞抗坏血酸比色法定量检测试剂盒20次

Ratmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISAKit大鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)检测试剂盒规格：96T/48T

MET重组食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白 (Fc 标签) Protein

IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha 0.5mgIKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha) KB抑制蛋白α抗原

WFDC2重组人 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 Protein

COL4A3BP Protein Human 重组人 COL4A3BP 蛋白 (His & GST 标签)

SPN Protein Mouse 重组小鼠 SPN / CD43 蛋白 (Fc 标签)

IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha 0.5mgIKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha) KB抑制蛋白α抗原

COL4A3BP Protein Human 重组人 COL4A3BP 蛋白 (His & GST 标签)

MET重组食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白 (Fc 标签) Protein

SPN Protein Mouse 重组小鼠 SPN / CD43 蛋白 (Fc 标签)

WFDC2重组人 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 Protein

小鼠神经降压肽()检测试剂盒 96T/48T

Human membrane attack complex (MAC) ELISA Kit 人膜攻击复合物(MAC)检测试剂盒

HumanHighdensitylipoproteincholesterol,HDL-CELISAKit 人高密度脂蛋白(HDL-C)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

GoatGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRP检测试剂盒山羊生长激素释放多肽(GHRP)检测试剂盒规格
：96T/48T

真菌/酵母碱性焦0酸酶(AlkalinePyrophosphatase)活性比色法定量检测试剂盒20次

MousecoagulationfactorⅩ,FⅩELISAKit小鼠Ⅹ(FⅩ)检测试剂盒规格
：96T/48T

兔胰腺上皮细胞小鼠前列腺素E2   英文名称：   prostaglandin E2   规格：      英文缩写：   PGE2

小鼠分泌型0脂酶A2   英文名称：   secretary phospholipase A2   规格：      英文缩写：   sPLA2

小鼠多效生长因子   英文名称
：   Pleioophin   规格
：      英文缩写：   PTN

小鼠抑癌基因P53蛋白   英文名称
：   aioncogene p53 protein   规格
：      英文缩写

：   P53

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月
。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁
。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用
，非食用