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① 组织块培养法

组织块培养是常用
、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层
，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞
，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化


，可采用低速离心分离
，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后

，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性
，可用于重点观察细胞间的联系
、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用
。

产品名称：兔小肠血管内皮细胞

英文名称：Rabbit Small Intestine Vascular Endothelial Cells

组织来源：小肠

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔小肠血管内皮分离自小肠组织
；小肠位于腹中
，上端接幽门与胃相通，下端通过阑门与大肠相连，是食物消化吸收的主要场所
。小肠盘曲于腹腔内，上连胃幽门，下接盲肠，分为十二指肠

、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的
，因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后，基本上完成了消化过程，同时营养物质被小肠粘膜吸收了

。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞，粘膜有许多绒毛，绒毛根部的上皮下陷至固有层，形成管状的肠腺，其开口位于绒毛根部之间
。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切；构成肠腺的细胞有柱状细胞
、杯状细胞
、潘氏细胞和未分化细胞

。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似，接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似
，绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短
，不形成纹状缘
。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能，其中以吸收和分泌功能为主

。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力，促使食物向下运动

。血管内皮细胞除了吞噬异物
、细菌

、坏死和衰老的组织等
，还参与集体免疫活动

，包括
：①血管收缩及血管舒张
，从而控制血压；②凝血（血栓形成及纤维蛋白溶解）；③动脉硬化；④血管生成
；⑤炎症及肿胀（浮肿）；⑥内皮细胞亦控制一些物质
，如白血球进出血管。

实验室分离的兔小肠血管内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶
。

质量检测

实验室分离的兔小肠血管内皮经CD31免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体
、细菌、酵母和真菌等。

包被条件
：PLL（0.1mg/ml）
，明胶（0.1%）

培养基
：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性
：可传2-3代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2
，5%

兔小肠血管内皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层
，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便
、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散
，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后
，细胞容易贴壁生长。

大鼠颗粒酶A(GZMA)检测试剂盒 ，英文名： GZMA ELISA Kit

Mouse apolipoprotein H (Apo-H) ELISA Kit 小鼠载脂蛋白H(Apo-H)检测试剂盒

RatPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit 大鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforFSH促卵泡生成素

细胞环氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1/2)总活性荧光定量检测试剂盒20次

RatplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit大鼠抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)检测试剂盒规格
：96T/48T

CD1D重组小鼠 CD1D / R3G1 蛋白 Protein

Caspase-1 (ICE; CASP-1;P45 0.5mgCaspase-1 (ICE; CASP-1;P45) 天冬-胱特异性蛋白酶家族(抗原)

ENO2重组人 NSE / ENO2 / Enolase 2 蛋白 Protein

GSTM2 Protein Human 重组人 GSTM2 / GST4 蛋白

GFRA1 Protein Rat 重组大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 (Fc 标签)

Caspase-1 (ICE; CASP-1;P45 0.5mgCaspase-1 (ICE; CASP-1;P45) 天冬-胱特异性蛋白酶家族(抗原)

GSTM2 Protein Human 重组人 GSTM2 / GST4 蛋白

CD1D重组小鼠 CD1D / R3G1 蛋白 Protein

GFRA1 Protein Rat 重组大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 (Fc 标签)

ENO2重组人 NSE / ENO2 / Enolase 2 蛋白 Protein

小鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human vitamin D receptor (VD R) ELISA Kit 人受体(VD R)检测试剂盒

Humanai-zonapellucidaaibody,aZPELISAKit 人抗透明带抗体(aZP)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humancholesterol,CH检测试剂盒人(CH)检测试剂盒规格
：96T/48T

紫外线处理DNA损伤彗星荧光检测试剂盒20次

HumansecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit人分泌型0脂酶A2(sPLA2)检测试剂盒规格：96T/48T

兔小肠血管内皮细胞兔乙酰(ACh)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

兔合成酶(NOS)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

兔氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

兔血小板衍生生长因子(PDGF)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用

，非食用