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细胞简介：

兔小肠黏膜上皮分离自小肠组织；小肠位于腹中
，上端接幽门与胃相通
，下端通过阑门与大肠相连，是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内，上连胃幽门
，下接盲肠
，分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的
，因为食物经过小肠内胰液
、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后，基本上完成了消化过程
，同时营养物质被小肠黏膜吸收了。小肠管壁由黏膜、黏膜下层、肌层和浆膜构成
。其结构特点是管壁有环形皱襞
，黏膜有许多绒毛
，绒毛根部的上皮下陷至固有层，形成管状的肠腺
，其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切；构成肠腺的细胞有柱状细胞
、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似，接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似，绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短
，不形成纹状缘
。小肠有三种功能即消化
、吸收和分泌及运动功能，其中以吸收和分泌功能为主。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力，促使食物向下运动。肠黏膜上皮细胞是机体内外环境的重要屏障
，持续暴露于大量抗原中，也是机体面对病原微生物的道防线。因此，肠黏膜上皮细胞除有吸收
、分泌和转运等重要生理功能之外

，在黏膜先天性和获得性免疫防御机制中也起着重要作用
。肠黏膜上皮细胞作为先接触抗原的细胞
，在黏膜免疫反应的起始阶段发挥关键作用
，它决定黏膜免疫反应的发生、性质和强度。

方法简介：

实验室分离的兔小肠黏膜上皮采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔小肠黏膜上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1、HBV、HCV
、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息


：

包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态
：上皮细胞样

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%

培养条件
：气相：空气
，95%；CO2，5%

兔小肠黏膜上皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min
，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3

、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液
，混悬10s
，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min
，弃去上清
，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5
、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定

：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时

，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2
、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5、PBS冲洗细胞3次

，每次10min，按1
：150的比例稀释抗α-actin的二抗

， 37℃条件下放置1h；

6
、用PBS冲洗3次
，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品
：

人载脂蛋白E(Apo-E)ELISA 试剂盒

Human TNF related activation induced cytokine (ANCE) ELISA Kit 人肿瘤坏死因子相关激活诱导因子(ANCE)检测试剂盒

Humanierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit 人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanInhibin,INH检测试剂盒人抑制素(INH)检测试剂盒规格：96T/48T

组织基质金属蛋白酶(MMP-7)活性荧光定量检测试剂盒20次

HumanLeptieceptor,LEPRELISAKit人瘦素受体(LEPR)检测试剂盒规格：96T/48T

PVRL1重组大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (Fc 标签) Protein

Gastrin(human 0.5mgGastrin(human)peptide(1-17) 胃泌素/蛙皮素(多肽人源)

F7重组人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白 Protein

IZUMO4 Protein Human 重组人 IZUMO4 / C19orf36 蛋白 (Fc 标签)

ACE2 Protein Mouse 重组小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (His & Fc 标签)

Gastrin(human 0.5mgGastrin(human)peptide(1-17) 胃泌素/蛙皮素(多肽人源)

IZUMO4 Protein Human 重组人 IZUMO4 / C19orf36 蛋白 (Fc 标签)

PVRL1重组大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (Fc 标签) Protein

ACE2 Protein Mouse 重组小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (His & Fc 标签)

F7重组人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白 Protein

豚鼠白介素12(IL-12/P70)检测试剂盒 
，英文名
： IL-12/P70 ELISA Kit

Human nonmethylated oligonucleotide (NON) ELISA Kit 人非甲基化寡核苷酸(NON)检测试剂盒

RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit 兔子表皮生长因子(EGF)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/M(HumanBeta2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M)ELISAKit人β2糖蛋白1抗体IgA/G/M

细菌印度墨负性染色试剂盒50次

RabbitE-SelectinELISAKit兔子E选择素(E-Selectin/CD62E)检测试剂盒规格
：96T/48T

兔小肠黏膜上皮细胞人载脂蛋白A1(apo-A1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人载脂蛋白B100(apo-B100)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人白血病抑制因子受体(LIFR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

A(IgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好
，培养液是否有漏液
、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象
。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因
，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况
，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。