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细胞简介
：

兔肾脏微血管内皮分离自肾脏
；肾脏是兔的重要器官
，它的基本功能是生成尿液，借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物

，同时经重吸收功能保留水分及其他有用物质
，如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子
、钾离子、等
，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能
，生成肾素、促红细胞生成素
、活性3
、前列腺素
、激肽等
，又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定
，使新陈代谢得以正常进行
。肾脏内部的结构，可分为肾实质和肾盂两部分
。在肾纵切面可以看到，肾实质分内外两层
：外层为皮质
，内层为髓质
。肾皮质位于肾实质表层，富含血管，新鲜时呈红褐色，由一百多万个肾单位组成。每个肾单位由肾小体和肾小管所构成，部分皮质伸展至髓质锥体间，成为肾柱
。肾髓质位于肾皮质的深面
，血管较少，色淡红
，为10-20个锥体所构成。肾锥体在切面上呈三角形。锥体底部向肾凸面，向肾门
，锥体主要组织为集合管，锥体称肾乳头，每一个乳头有10-20个乳头管
，向肾小盏漏斗部开口。在肾窦内有肾小盏
，为漏斗形的膜状小管
，围绕肾乳头。肾锥体与肾小盏相连接。每肾有7-8个肾小盏
，相邻2-3个肾小盏合成一个肾大盏。每肾有2-3个肾大盏，肾大盏汇合成扁漏斗状的肾盂。肾盂出肾门后逐渐缩窄变细，移行为输尿管。肾单位是肾脏结构和功能的基本单位。肾小体包括肾小球和肾小囊。肾小体内有一个毛细血管团，称为肾小球，肾小球是个血管球
。它由肾动脉分支形成
。肾小球外有肾小囊包绕。肾小囊分两层
，两层之间有囊腔与肾小管的管腔相通

。肾小管汇成集合管
。若干集合管汇合成乳头管，尿液由此流入肾小盏。微血管又称毛细血管。分布于各种组织和细胞间的微细的血管
。介于微动脉和微静脉之间
。平均直径7-9微米
，数量极多，成网状分布。管壁由一层内皮细胞及一薄层基膜组成，厚约0.5微米。基膜外面有薄层结缔组织
，其中有纤维细胞、巨噬细胞和周细胞等。细的毛细血管由一个内皮细胞围成管腔，较粗的毛细血管由2-3个内皮细胞围成。分布于肌肉组织、神经组织和结缔组织中的毛细血管，内皮细胞间为缝隙连接（缝隙宽150埃），称连续毛细血管；分布于内分泌腺、肾脏等处的毛细血管，除有缝隙连接外，细胞本身有许多小孔
，（孔径800-1000埃）

，称有孔毛细血管
；分布于肝、脾、骨髓及某些内分泌腺的毛细血管，管腔扩大，称血窦。毛细血管的管壁薄、通透性大、管径细（8-10微米）、数量多、血流速度慢
，这些特点使其成为血液与组织液进行物质交换的场所，又称交换血管

。血窦（sinusoid）由毛细血管管腔扩大而成，窦壁的一般结构与毛细血管壁相同，由单层内皮细胞构成，内皮细胞膜上有窗孔
。不同器官的窦壁结构各有差别
。脾血窦的内皮细胞间有较宽裂隙
；肝血窦内皮细胞是不连续的，有较宽的细胞隙（0.1-0.5微米）
；肝
、脾血窦的基膜不完整或无基膜
，通透性比毛细血管大
，较大的蛋白质和血细胞可以通过。肝血窦壁内有枯否细胞
，脾血窦内外有巨噬细胞，这两种细胞都有吞噬能力，可吞噬清除血液中的异物、细菌等有害物质，是机体单核巨噬细胞系统的重要组成分
。某些内分泌腺的血窦有连续的基膜

。

方法简介
：

实验室分离的兔肾脏微血管内皮采用胶原酶消化
，结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔肾脏微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件：PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基
：含FBS

、EGF、bFGF
、IGF
、VEGF、Heparin
、Hydrocortisone
、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性

：可传2-3代

消化液

：0.25%

培养条件：气相：空气

，95%；CO2，5%

兔肾脏微血管内皮体外培养周期有限
；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态
。

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次

，将组织剪成1mm3左右大小；

2

、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s

，置37℃条件下消化10min
，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s

，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置
，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化

；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min，弃去上清
，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶

，放置于37℃ 
，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养
；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时
，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3
、PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗
，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

豚鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)检测试剂盒 
，英文名： IL1Ra ELISA Kit

Human ubiquitin activating enzyme (E1/UBAE) ELISA Kit 人泛素激活酶(E1/UBAE)检测试剂盒

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Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit兔子神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)检测试剂盒规格
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豚鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA 试剂盒 96T/48T

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HumanhistoneH2A-H2B-DNAaoaibodyELISAKit 人抗组蛋白(H2A-H2B)-DNA抗体/抗二聚体-DNA抗体检测试剂盒 96T/48T 进口分装

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Humanprealbumin，PAELISAKit人前白蛋白(PA)检测试剂盒规格：96T/48T

兔肾脏微血管内皮细胞人脂肪型脂肪酸结合蛋白试剂盒检测试剂盒   人脂肪型脂肪酸结合蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   人脂肪型脂肪酸结合蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装）

，产品别名：人脂肪型脂肪酸结合蛋白试剂盒
、人脂肪型脂肪酸结合蛋白试剂盒检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

人细胞外基质0酸糖蛋白检测试剂盒   人细胞外基质0酸糖蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   人细胞外基质0酸糖蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源
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：2-8℃   保质期：6个月
。

人髓样分化因子初次应答基因88检测试剂盒   人髓样分化因子初次应答基因88试剂盒   规格型号：96T/48T   人髓样分化因子初次应答基因88试剂盒
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人丝酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3G检测试剂盒   人丝酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3G试剂盒   规格型号
：96T/48T   人丝酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3G试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装）
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。

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象
，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息
，如细胞形态
、所用培养基

、血清比例、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题

，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系
，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 
。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。