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① 组织块培养法

组织块培养是常用
、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中
，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离
，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系
、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：兔肾小球系膜细胞

英文名称：Rabbit Glomerular Mesangial Cells

组织来源：肾

产品规格

：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔肾小球系膜分离自肾小球组织；肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛，被鲍氏囊所包裹，是尿液形成的重要构造
。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管，汇流入静脉
，而是流入出球小动脉
。在肾小球内，微血管受到高压
，而加速了超滤作用（hyperfiltration）的进行
。微血管中的血液经由超滤作用之后，形成滤液，渗入鲍氏囊内
。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体，肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率
。肾小球系膜是位于肾小球毛细血管袢之间的一种特殊间充质，由系膜细胞和系膜基质组成。肾小球系膜细胞是肾小球内非常活跃的细胞，具有分泌细胞基质、产生细胞因子、吞噬和清除大分子物质及类似平滑肌细胞收缩的功能
。肾小球系膜细胞增生和基质的过多产生是多种肾小球肾炎的主要病理表现。肾小球系膜细胞的培养是研究系膜扩张、瘢痕形成和肾小球硬化的理想方法
。系膜细胞的主要作用可能有
：①收缩作用

，入球小动脉和出球动脉的收缩作用受系膜细胞的调节，以影响毛细血管袢的内压和滤过率；②支持作用，它填充于毛细血管袢之间，支持毛细血管的位置；③吞噬作用，能吞噬被阻留在基膜内的大分子物质和蛋白质；④分泌肾素，在肾缺血或免疫复合物沉积时
，系膜细胞增生且分泌肾素
。

实验室分离的兔肾小球系膜采用机械研磨法结合不同孔径不锈钢网筛过滤后使用胶原酶消化制备而来
，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔肾小球系膜经α-SMA免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件：PLL（0.1mg/ml）

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性
：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%
；CO2

，5%

兔肾小球系膜体外培养周期有限
；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态

。

取材→分离→培养和维持

1
、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料
，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大
，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松

，由块状变成絮状

，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

小鼠过敏毒素/补体片断4a(C4a)试剂盒   96T/48T

小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)试剂盒   96T/48T

小鼠胱天蛋白酶8(Casp-8)试剂盒   96T/48T

小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)试剂盒   96T/48T

小鼠抗(AT)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat ai monocyte aibody (AMA) ELISA Kit 大鼠抗单核细胞抗体(AMA)试剂盒

HumanfibrinopeptideB,FPBELISAKit 人血纤肽/纤维蛋白肽B(FPB)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanAmebiasis试剂盒人阿米巴(Amebiasis)试剂盒规格：96T/48T

植物单酚氧化酶(monophenolase)活性比色法定量试剂盒20次

MonkeyIerleukin2,IL-2ELISAKit猴白介素2(IL-2)试剂盒规格：96T/48T

ERBB2重组恒河猴 HER2 / ErbB2 蛋白 Protein

P19ARF p19ARF抑癌基因抗原 0.5mgP19ARF p19ARF抑癌基因抗原

CA8重组人 Carbonic Anhydrase VIII / CA8 蛋白 Protein

DNASE1 Protein Human 重组人 DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 蛋白

IFNA5 Protein Mouse 重组小鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白

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兔肾小球系膜细胞大鼠接触蛋白4(CN4)试剂盒 ，英文名

： CN4 ELISA Kit

Mouse neuophil elastase (NE) ELISA Kit 小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)试剂盒

RatplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforFishi-iodothyronine,T3ELISAKit鱼类三甲状腺原

细胞基质金属蛋白酶(MMP-1)活性荧光定量试剂盒20次

RatovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISAKit大鼠卵清蛋白特异性IgE(OVAsIgE)试剂盒规格：96T/48T

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月
。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁
。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用