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细胞简介：

兔肾上腺皮质分离自肾上腺组织；肾上腺是机体相当重要的内分泌器官
，由于位于两侧肾脏的上方，故名肾上腺。肾上腺左右各一，位于肾的上方
，共同为肾筋膜和脂肪组织所包裹。左肾上腺呈半月形，右肾上腺为三角形。从侧面观察，腺体分肾上腺皮质和肾上腺髓质两部分
，周围部分是皮质
，内部是髓质
。肾上腺内部是髓质部分，分泌肾上腺素和。这些激素在应激状态释放增多，能够帮助升高血压
，加快心率，升高血糖
，动员全身的储备物质，为机体与外界环境的抗争作好充分准备
。肾上腺外部是皮质部分
，分泌醛固酮、和少量的雌雄激素。醛固酮能够促进小便中尿钾的排出和尿钠的重吸收，正常数量的醛固酮，对维持机体正常血压有重要作用。但是如果过多分泌，会导致高血压和低血钾。是机体必需的激素之一
。当机体处于应激状态时，比如感冒

，发烧，遇到突发事件的时候，肾上腺皮质分泌大量的，这些能够动员机体的存储能源，为应对内部或者外部重要事件提供充分的物质准备。当缺乏时

，机体在遇到重大事件的时候
，往往缺乏足够应对能力

，容易被病毒或外界压力所击倒。肾上腺产生的雄激素，对雄性来讲
，并非，但是对雌性而言
，是雄激素的一个重要来源。

方法简介
：

实验室分离的兔肾上腺皮质采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔肾上腺皮质经3β-HSD免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1、HBV
、HCV、支原体、细菌
、酵母和真菌等
。

培养信息
：

包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基
：含FBS、生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率

：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：梭形、多角形

传代特性
：可传1-3代左右
；2代以内状态佳

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气
，95%；CO2
，5%

兔肾上腺皮质体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态
。

实验报告：

一、分离与培养
：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置
；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s

，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置
，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化

；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养
；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养
；二、免疫荧光鉴定

：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2

、PBS冲洗细胞2次

，每次10min
，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗
，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1
：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次
，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照

。

公司正在出售的产品：

兔子髓0脂碱性蛋白试剂盒   兔子髓0脂碱性蛋白试剂盒   规格型号
：96T/48T   兔子髓0脂碱性蛋白试剂盒
，规格型号：96T/48T
，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：兔子髓0脂碱性蛋白试剂盒
、兔子髓0脂碱性蛋白eisa试剂盒   保存条件

：2-8℃   保质期
：6个月。

兔子结合蛋白4试剂盒   兔子结合蛋白4试剂盒   规格型号
：96T/48T   兔子结合蛋白4试剂盒
，规格型号
：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：兔子结合蛋白4试剂盒、兔子结合蛋白4eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期
：6个月
。

兔子透明质酸试剂盒   兔子透明质酸试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子透明质酸试剂盒，规格型号：96T/48T，来源
：试剂盒（进口分装），产品别名：兔子透明质酸试剂盒、兔子透明质酸eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期

：6个月。

人血管紧张素原试剂盒   人血管紧张素原试剂盒   规格型号：96T/48T   人血管紧张素原试剂盒，规格型号
：96T/48T，来源
：试剂盒（进口分装）
，产品别名
：人血管紧张素原试剂盒、人血管紧张素原eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠半胱酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat aldosterone (ALD) ELISA Kit 大鼠固酮(ALD)试剂盒

Humanexacellularsignal-regulatedkinase,ERKELISAKit 人细胞外信号调节激酶(ERK)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgG试剂盒人菌抗体IgG(BrucellaAbIgG)试剂盒规格：96T/48T

植物组织叶绿体DNA萃取试剂盒10/20次

Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit人可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)试剂盒规格：96T/48T

IL10重组猫 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein

NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB 0.5mgNFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 细胞核因子或称k基因结合核因子(多肽抗原)

TWF1重组人 TWF1 / PTK9 / Twinfilin-1 蛋白 Protein

GALE Protein Human 重组人 GALE / UDP galactose-4-epimerase 蛋白

S100A8 Protein Mouse 重组小鼠 S100A8 / CAGA 蛋白

NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB 0.5mgNFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 细胞核因子或称k基因结合核因子(多肽抗原)

GALE Protein Human 重组人 GALE / UDP galactose-4-epimerase 蛋白

IL10重组猫 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein

S100A8 Protein Mouse 重组小鼠 S100A8 / CAGA 蛋白

TWF1重组人 TWF1 / PTK9 / Twinfilin-1 蛋白 Protein

兔肾上腺皮质细胞大鼠巨嗜细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2)试剂盒 ，英文名

： MCP-1/CCL2 ELISA Kit

Mouse ciliary neuroophic factor (CF) ELISA Kit 小鼠睫状神经营养因子(CF)试剂盒

MousephosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit 小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit人胰多肽

同位素标记放射活性离心柱试剂盒20次

ELISAKitpERK大鼠0酸化细胞外信号调节激酶

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态
。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养

。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因
，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞
。收到细胞后次传代建议1
：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。