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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法
。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁
，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞

，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离
，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用
。

产品名称：兔破骨细胞

英文名称：Rabbit Osteoclast Cells

组织来源
：骨髓

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔破骨分离自骨组织和骨髓
；破骨细胞是骨组织中的多核巨细胞，位于骨组织表面的浅凹处
。目前一般认为破骨细胞是分离自骨骼外的造血系统，其前体可能属于造血干细胞的前单核细胞

。破骨细胞的主要功能是维持骨吸收和骨形成的相对平衡
，若失去这种平衡则发生病理性变化。因此多数学者从破骨细胞着手研究破骨细胞的结构、功能探讨骨吸收
，形成相互平衡的机制。但破骨细胞是一种终末分化细胞

，属于不增殖细胞群，不能增殖和传代
，只能进行原代培养且存活时间较短
。

实验室分离的兔破骨采用机械分离法/密度梯度离心法和骨髓单核细胞诱导法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔破骨经TRAP染色检测，纯度可达30%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体
、细菌
、酵母和真菌等
。

培养基：含FBS、生长添加剂
、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率
：每2-3天换液一次

生长特性
：贴壁

细胞形态：多核、巨细胞

传代特性：属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气

，95%；CO2，5%

兔破骨体外培养周期有限
；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态
。

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件
，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料

，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便
、快速,但对组织机械损伤大

，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织
。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松
，由块状变成絮状
，此时再采用机械法
，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散
，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

小鼠孤儿受体配体   英文名称
：   Mouse Aemin   规格：      英文缩写：   A

小鼠α葡萄糖苷酶   英文名称

：   Mouse α Glucosidase   规格：      英文缩写：   AG

小鼠雄激素   英文名称：   Mouse Androgen   规格：      英文缩写：   ADG

酰基氧化酶   英文名称
：   Mouse Acyl-CoA oxidase   规格：      英文缩写
：   ACO

小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human heat shock protein 90 (HSP-90) ELISA Kit 人热休克蛋白90(HSP-90)试剂盒

HumanCaveolin-1,Cav-1ELISAKIT 人窖蛋白Caveolin1(Cav-1)试剂盒 96T/48T 进口分装

humanangiotensinⅡreceptoypeⅠa,AgⅠa试剂盒人血管紧张素Ⅱ受体Ⅰa型(AgⅠa)试剂盒规格
：96T/48T

植物高内质网分离试剂盒10次

Humanβ-subunitsofhemoglobin,HB-βELISAKit人血红蛋白β亚基(HB-β)试剂盒规格：96T/48T

EPHA4重组大鼠 EphA4 蛋白 Protein

GLUT12 葡萄糖转运蛋白12 0.5mgGLUT12 葡萄糖转运蛋白12

STXBP3重组人 STXBP3 / UNC-18C 蛋白 (His & GST 标签) Protein

DYDC2 Protein Human 重组人 DYDC2 / DPY30 domain containing 2 蛋白 (GST 标签)

SRC Protein Mouse 重组小鼠 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 蛋白 (His & GST 标签)

GLUT12 葡萄糖转运蛋白12 0.5mgGLUT12 葡萄糖转运蛋白12

DYDC2 Protein Human 重组人 DYDC2 / DPY30 domain containing 2 蛋白 (GST 标签)

EPHA4重组大鼠 EphA4 蛋白 Protein

SRC Protein Mouse 重组小鼠 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 蛋白 (His & GST 标签)

STXBP3重组人 STXBP3 / UNC-18C 蛋白 (His & GST 标签) Protein

兔破骨细胞大鼠抗胰岛细胞抗体(ICA)试剂盒 ，英文名
： ICA ELISA Kit

Mouse mucin / mucin 5AC (MUC5AC) ELISA Kit 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)试剂盒

RatiactParathormone,i-PTHELISAKit 大鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforFS(MouseFollistatin)ELISAKit小鼠卵泡抑素

细胞环氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性荧光定量试剂盒20次

Ratplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit大鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)试剂盒规格
：96T/48T

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用