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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中
，瓶壁可预先涂以胶原薄层
，以利于组织块粘着于瓶壁
，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养

。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系

、排列情况和相互影响

，以及局部环境的生物调节作用
。

产品名称：兔晶状体上皮细胞

英文名称：Rabbit Lens Epithelial Cells

组织来源：晶状体组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔晶状体上皮分离自晶状体组织；晶状体源自胚胎发育外胚层，仅含有上皮细胞及其产物
，晶状体囊膜作为屏障将晶状体与其它类型细胞分开
；因而

，晶状体上皮细胞培养既无神经和血管组织的干扰，又不受其它类型细胞如成纤维细胞的污染


，保证了培养中细胞成分的单一性。晶状体上皮细胞主要负责调节晶状体的生理平衡，包括电解质和液体的输送
。在正常的发育过程中
，晶状体上皮细胞分化和成熟，然后迁移到晶状体内部，产生晶体蛋白
，自身也拉长而变成晶状体纤维细胞

，并终失去细胞核和其它的细胞器。研究表明，晶状体上皮细胞的分化和极化受到了眼部液体中的生长因子的调控，包括表皮生长因子和胰岛素等。细胞贴壁后为扁平不规则多角形
，呈单层生长、连成膜状。晶状体上皮细胞是紧密贴附于晶状体前囊内表面的单层上皮细胞
，其异常增殖和分化与白内障和后囊混浊的发生密切相关

，体外培养是研究其生长规律的主要手段。

公司实验室分离的兔晶状体上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的兔晶状体上皮经BFSP2（晶状体蛋白）免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1、HBV
、HCV
、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气，95%；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件

，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度

、年龄等

⑥ 作好记录

2
、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟

。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便
、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动
，使团块膨松
，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散


，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后
，细胞容易贴壁生长。

小鼠β内啡肽受体(β-EPR)试剂盒   96T/48T

小鼠β内啡肽(β-EP)试剂盒   96T/48T

小鼠β甘露糖苷酶(βManase)试剂盒   96T/48T

小鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)试剂盒   96T/48T

小鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat thioredoxin reductase (xR) ELISA Kit 大鼠硫氧还蛋白还原酶(xR)试剂盒

humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit 人谷脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanai-neuophilgranulesaibody,ANGA试剂盒人抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)试剂盒规格：96T/48T

植物乳酸脱氢酶(LDH)总活性酶动力比色法定量试剂盒20次

HumanUlaSensitiveProstateSpecificAigen,PSAUSELISAKit人超敏前列腺特异性抗原(PSA-US)试剂盒规格：96T/48T

BACE1重组小鼠 BACE-1 蛋白 Protein

Clenbuterol Hydrochloride/BSA 盐酸克偶联牛血清白蛋白BSA 1mgClenbuterol Hydrochloride/BSA 盐酸克偶联牛血清白蛋白BSA

LSAMP重组人 LSAMP 蛋白 Protein

F3 Protein Human 重组人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白

CD38 Protein Mouse 重组小鼠 SCARB3 蛋白

Clenbuterol Hydrochloride/BSA 盐酸克偶联牛血清白蛋白BSA 1mgClenbuterol Hydrochloride/BSA 盐酸克偶联牛血清白蛋白BSA

F3 Protein Human 重组人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白

BACE1重组小鼠 BACE-1 蛋白 Protein

CD38 Protein Mouse 重组小鼠 SCARB3 蛋白

LSAMP重组人 LSAMP 蛋白 Protein

兔晶状体上皮细胞大鼠酪酸3/色酸5单加氧酶激活蛋白ζ(YWHAζ)试剂盒 ，英文名
： YWHAζ ELISA Kit

Mouse inducible niic oxide syhase (iNOS) ELISA Kit 小鼠诱导型合成酶(iNOS)试剂盒

RatParathyroidHormone-LikeRelatedProtein,PTHrPELISAKit 大鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforF-TESTOELISAKit大鼠游离睾同

细胞黑色素(MELANIN)染色试剂盒50次

RatprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit大鼠Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢ)试剂盒规格
：96T/48T

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用
，非食用