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细胞简介
：

兔颌下腺上皮分离自颌下腺组织；颌下腺是下颌部的唾液腺，左右各一个。颌下腺属于唾液腺的一种
，主要的功能就是分泌唾液。机体共有三大唾液腺，包括腮腺
、颌下腺及舌下腺。颌下腺位于下颌骨的下方，接近下颌骨弯曲角附近，所以也叫下颌下腺（下颌骨下方的唾液腺），左右各一，由舌下舌系带两侧处伸出颌下腺排泄管，主要分泌黏液和浆液状性质的唾液。颌下腺上皮细胞是一种高度分化的上皮细胞
，在体外难以长期存活和保持分化状态；颌下腺的主要病理变化有：①颌下腺炎；②颌下腺囊肿；③颌下腺肿

；④颌下腺结石。

方法简介：

实验室分离的兔颌下腺上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶
。

质量检测

实验室分离的兔颌下腺上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1
、HBV
、HCV
、支原体、细菌、酵母和真菌等
。

培养信息：

包被条件
：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基：含FBS、生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率
：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态
：上皮细胞样

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%

培养条件：气相

：空气，95%
；CO2，5%

兔颌下腺上皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

实验报告：

一

、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min

，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置
；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液
，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化
；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃
，5％CO2 培养箱中培养；

5
、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min

，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min
；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5
、PBS冲洗细胞3次

，每次10min
，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗

， 37℃条件下放置1h；

6
、用PBS冲洗3次
，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

小鼠坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

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：96T/48T

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NME1重组人 NME1 / NDKA 蛋白 Protein

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CD27 Protein Human 重组人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (His & Fc 标签)

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兔颌下腺上皮细胞大鼠淋巴细胞功能关联抗原2(LFA2)试剂盒 
，英文名

： LFA2 ELISA Kit

Mouse oncostatin M (OSM) ELISA Kit 小鼠抑瘤素M(OSM)试剂盒

Ratglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit 大鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforGATA4ELISAKit大鼠GATA结合蛋白4

细胞还原酶活性比色法定量试剂盒20次

RatProteinPhosphatase,PPELISAKit大鼠蛋酸酶(PP)试剂盒规格：96T/48T

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象
，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min

，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养
。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流
。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。