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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中
，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离

，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性
，可用于重点观察细胞间的联系
、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：兔海绵体内皮细胞

英文名称：Rabbit Cavernous Endothelial Cells

组织来源：海绵体

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔海绵体内皮分离自海绵体组织

；阴茎海绵体是由海绵状的小梁和腔隙构成的血窦结构，它主要包括海绵体内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞3种细胞成分
。其中平滑肌细胞和成纤维细胞镶嵌于海绵体细胞外基质的胶原中，而海绵体内皮细胞则覆盖于海绵体血窦的腔面，仅占海绵体组织的2.8%。在消化海绵体组织时，胶原酶的作用主要是松解海绵体内皮细胞与基膜的联系
，破坏海绵体内皮细胞间的紧密连接。如果消化时间延长或胶原酶浓度过大，平滑肌细胞和成纤维细胞也将被消化下来，从而影响海绵体内皮细胞的纯度。因此
，比较筛选合适的胶原酶浓度和消化时间是成功分离海绵体内皮细胞的关键

。

实验室分离的兔海绵体内皮采用混合酶消化法结合机械分离法

、并用内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔海绵体内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV

、支原体
、细菌、酵母和真菌等。

包被条件：PLL（0.1mg/ml）


，明胶（0.1%）

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性
：贴壁

细胞形态
：内皮细胞样

传代特性
：可传2-3代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2
，5%

兔海绵体内皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养
，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1
、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养

。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水、胸水或腹水的悬液材料
，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层
，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料

，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长
。

大鼠雌激素转移酶(SULT1E1)检测试剂盒 ，英文名
： SULT1E1 ELISA Kit

Mouse type III procollagen (P III NP) ELISA Kit 小鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)检测试剂盒

ELISA 小鼠CXC趋化因子受体3(mouse CXCR3)  进口分装

CLIAKitforLFA-3/CD58(Mouselymphocytefunctionassociatedaigen3)ELISAKit小鼠淋巴细胞功能相关抗原3

通用型HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒定性检测试剂盒20次

ELISAKitET-1内皮素1

CD320重组小鼠 CD320 / 8D6A 蛋白 (Fc 标签) Protein

角蛋白16(KRT16)重组蛋白 Recombinant Keratin 16 (KRT16)

LILRB1重组人 LILRB1 / CD85 / ILT2 / ILR1 蛋白 Protein

CLU Protein Human 重组人 Clusterin / Apolipoprotein J / Apo-J / CLU 蛋白

PCSK9 Protein Rhesus 重组恒河猴 PCSK9 / NARC1 蛋白

角蛋白16(KRT16)重组蛋白 Recombinant Keratin 16 (KRT16)

CLU Protein Human 重组人 Clusterin / Apolipoprotein J / Apo-J / CLU 蛋白

CD320重组小鼠 CD320 / 8D6A 蛋白 (Fc 标签) Protein

PCSK9 Protein Rhesus 重组恒河猴 PCSK9 / NARC1 蛋白

LILRB1重组人 LILRB1 / CD85 / ILT2 / ILR1 蛋白 Protein

小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human immunoreactive growth hormone (irGH) ELISA Kit 人免疫反应性生长激素(irGH)检测试剂盒

Humandesmin,DesELISAKit 人结蛋白(Des)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Elisa病毒抗体检测试剂盒5*96孔5*96孔

增强型HRP-DAB底物显色试剂盒10次

MouseCXC-chemokinereceptor3,CXCR3ELISAKit小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)检测试剂盒规格：96T/48T

兔海绵体内皮细胞小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠三0酸腺苷（ATP）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠三腺原酸（T3）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠状腺原酸(T3)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁

。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用