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① 组织块培养法

组织块培养是常用
、简便易行和成功率较高的原代培养方法
。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中

，瓶壁可预先涂以胶原薄层
，以利于组织块粘着于瓶壁
，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞
、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化

，可采用低速离心分离，直接培养

，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：兔表皮角化细胞

英文名称：Rabbit Epidermal Keratinized Cells

组织来源
：皮肤

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔表皮角化分离自皮肤组织；表皮位于动物皮肤的外层，由胚胎时期外胚层形成
，具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构
，由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层

，即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层
。表皮角化细胞（KC）是构成表皮的主要细胞成分，在体内处于不断增殖过程中，分裂的角化细胞主要位于其基底层，少数位于棘细胞层。随着向表层的推移，细胞的分化程度逐渐增加，并丧失分裂活性。

实验室分离的兔表皮角化先消化
、后-胶原酶混合消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶

。

质量检测

实验室分离的兔表皮角化经PCNA免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体

、细菌
、酵母和真菌等。

包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基
：含FBS、生长添加剂
、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率
：每2-3天换液一次

生长特性

：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%

培养条件：气相
：空气，95%
；CO2，5%

兔表皮角化体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养
，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1
、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2
、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水、胸水或腹水的悬液材料
，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便
、快速,但对组织机械损伤大
，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织
。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松
，由块状变成絮状
，此时再采用机械法

，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长
。

大鼠肝X受体β(LXRβ)检测试剂盒 
，英文名
： LXRβ ELISA Kit

Iestinal efoil factor (ITF) ELISA Kit 猪肠三叶因子(ITF)检测试剂盒

人博卡病毒(HBoV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforMCV(Humanai-matedciullinatedvimeinaibody)ELISAKit人抗突变型瓜波形蛋白抗体

体液人体腺病毒(adenovirus)定量PCR扩增检测试剂盒20次

ELISAKitβOHB牛β

LDLR重组人 LDLR / LDL Receptor 蛋白 Protein

血管生成素样蛋白6(ANGPTL6)重组蛋白 Recombinant Angiopoietin Like Protein 6 (ANGPTL6)

HA重组甲型流感 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

IL18RAP Protein Human 重组人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (Fc 标签)

GP140 Protein HIV 重组人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC)

血管生成素样蛋白6(ANGPTL6)重组蛋白 Recombinant Angiopoietin Like Protein 6 (ANGPTL6)

IL18RAP Protein Human 重组人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (Fc 标签)

LDLR重组人 LDLR / LDL Receptor 蛋白 Protein

GP140 Protein HIV 重组人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC)

HA重组甲型流感 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)检测试剂盒 ，英文名
： OVA sIgE ELISA Kit

Eighth factor related aigen (F VIII Ag) ELISA Kit 人第八因子相关抗原(FⅧAg)检测试剂盒

MonkeyTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 猴坏死因子α(TNF-α)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBGP/Gehrelin(Humanbrain-gpeptides)Elisakit人脑肠肽

细菌葡萄糖酵解酚红琼脂平板50个

RabbitLactoferrin,LTF/LFELISAKit兔乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)检测试剂盒规格：96T/48T

兔表皮角化细胞乳糖   100g

D-Lactosemonohydrate   500g

二硫赤鲜醇   5g

DL-DTE

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行

。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的
，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用
，非食用