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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离
，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：人直肠平滑肌细胞

英文名称：Human Rectal Smooth Muscle Cells

组织来源：直肠组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

人直肠平滑肌分离自直肠组织
；直肠为大肠的未段，位于小骨盆内。上端平第3骶椎处接续乙状结肠，沿骶骨和尾骨的前面下行
，穿过盆膈
，下端以而终
。直肠上端的大小似结肠
，其下端扩大成直肠壶腹

，是粪便排出前的暂存部位，下端变细接管。直肠在盆腔内的位置与骶椎腹面关系密切，与骶椎有相同的曲度。直肠周围多脂肪、无纵带

，位于膀胱和生殖器官的背侧。直肠平滑肌细胞原代分离培养3天后

，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形

、三角形或扇形
，核卵圆形
、居中

；2周后细胞汇合
，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状
。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合
，并保持上述形态学特征和生长特点。直肠的动脉血供主要是来自肠系膜下动脉的直肠上动脉
，来自髂内动脉的直肠中动脉和来自髂内动脉的直肠下动脉
。平滑肌收缩是胃肠蠕动中基本的运动方式；肠炎时由于平滑肌特殊肌动蛋白的增加导致了平滑肌层的增厚。平滑肌肌动蛋白可能影响收缩力的产生，这进一步证明了炎症时的肠平滑肌细胞具有可塑性

。利用肠平滑肌细胞的培养，可以帮助了解收缩、增殖和胃肠道结缔组织对平滑肌细胞的反应
。

公司实验室分离的人直肠平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来
，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的人直肠平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV
、支原体、细菌、酵母和真菌等
。

培养基 含FBS
、生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右
；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%
；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件
，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型

、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2
、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料
，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟
。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层
，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散
，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便
、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动
，使团块膨松，由块状变成絮状
，此时再采用机械法
，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后
，细胞容易贴壁生长
。

小鼠鸟酸脱羧酶   英文名称
：   Mouse Ornithine Decarboxylase   规格：      英文缩写
：   ODC

小鼠卵清蛋白特异性IgE   英文名称

：   Mouse ovalbumin specific Immunoglobulin E   规格
：      英文缩写
：   OVA sIgE

小鼠氧化低密度脂蛋白   英文名称：   Mouse oxidized Low Density Lipoprotein   规格
：      英文缩写
：   oxLDL

小鼠骨保护素   英文名称：   Osteoprotegerin   规格
：      英文缩写：   OPG

小鼠绒毛膜(CG)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human enkephalin (ENK) ELISA Kit 人脑啡肽(ENK)试剂盒

HumanVacuolatingcytotoxinA,VacAELISAKit 人空泡毒素相关蛋白A(VacA)试剂盒 96T/48T 进口分装

guineapigImmunoglobulinE,IgE试剂盒豚鼠免疫球蛋白E(IgE)试剂盒规格
：96T/48T

真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性超敏荧光定量试剂盒20次

MousecardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISAKit小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)试剂盒规格

：96T/48T

IL6ST重组小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 蛋白 Protein

alpha Adaptin/AP1 衔接蛋白α抗原 0.5mgalpha Adaptin/AP1 衔接蛋白α抗原

C1D重组人 C1D 蛋白 (GST 标签) Protein

CPLX2 Protein Human 重组人 Complexin-2 / CPLX2 蛋白

BST1 Protein Rat 重组大鼠 CD157 / BST1 蛋白 (Fc 标签)

胞外超氧化物歧化酶(SOD3)重组蛋白 Recombinant Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3)

CPLX2 Protein Human 重组人 Complexin-2 / CPLX2 蛋白

IgG2a重组小鼠 IgG2a-Fc 蛋白 Protein

CD59 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白

AKR1C2重组人 AKR1C2 蛋白 Protein

人直肠平滑肌细胞大鼠平足蛋白(PDPN)试剂盒 ，英文名

： PDPN ELISA Kit

Mouse thrombomodulin (TM) ELISA Kit 小鼠血栓调节蛋白(TM)试剂盒

RatSubstanceP,SPELISAKit 大鼠P物质(SP)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforGP-BB(HumanGlycogenphosphorylaseBB)ELISAKit人糖原0酸化酶同工酶BB

细胞调亡DNA条带试剂盒10次

Ratthyroxine,T4ELISAKit大鼠甲状腺素(T4)试剂盒规格
：96T/48T

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗
，非药用，非食用