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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法

。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层
，以利于组织块粘着于瓶壁

，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞
、淋巴细胞
、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用
。

产品名称：人真皮淋巴上皮细胞

英文名称：Human Dermal Lympho Epithelial Cells

组织来源：皮肤组织

产品规格
：5×105cells/T25细胞培养瓶

人真皮淋巴上皮分离自真皮组织
；真皮，位于表皮深层
，向下与皮下组织相连
，真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起，埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维，使皮肤既有弹性

，又有韧性

。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质

。微血管内皮细胞（MEC）在炎症反应

、肿瘤生长、创面愈合过程中起着非常重要的作用。在创面愈合研究领域
，由于表皮细胞、真皮成纤维细胞体外培养技术的成熟，人们对这两种细胞早已进行了大量深入的研究。

公司实验室分离的人真皮淋巴上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法
，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来
，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的人真皮淋巴上皮经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV
、HCV
、支原体、细菌、酵母和真菌等
。

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS

、生长添加剂
、Penicillin

、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气
，95%
；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1
、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件
，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来

。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层
，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大
，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动
，使团块膨松
，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长
。

大鼠波形蛋白(VIM)检测试剂盒
，英文名： VIM ELISA Kit

Mouse alpha L iduronidase (IDUA) ELISA Kit 小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)检测试剂盒

ELISA 小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(mouse ECP)  进口分装

CLIAKitforKLK6(HumanKallikrein6)ELISAKit人6

通用型肠杆菌(EerobacteriaceaSTX1)试剂盒20次

ELISAKithiston-H2b大鼠组蛋白H2b

IL8重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77) Protein

盘状结构域受体家族成员1(DDR1)重组蛋白 Recombinant Discoidin Domain Receptor Family, Member 1 (DDR1)

NPC2重组人 Niemann-Pick disease type C2 / NPC2 蛋白 Protein

HSP90AA1 Protein Human 重组人 HSP90AA1 / HSP90 蛋白

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

盘状结构域受体家族成员1(DDR1)重组蛋白 Recombinant Discoidin Domain Receptor Family, Member 1 (DDR1)

HSP90AA1 Protein Human 重组人 HSP90AA1 / HSP90 蛋白

IL8重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77) Protein

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

NPC2重组人 Niemann-Pick disease type C2 / NPC2 蛋白 Protein

小鼠C反应蛋白(CRP)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat vitamin E (VE) ELISA Kit 大鼠(VE)检测试剂盒

Human5-Hydroxyyptamine,5HTELISAKit 人5羟色胺(5-HT)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humancolony-stimulatingfactor,CSF检测试剂盒人集落刺激因子(CSF)检测试剂盒规格：96T/48T

组织AURORA-B激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

HumanPyridinoline,PYDELISAKit人酚(PYD)检测试剂盒规格
：96T/48T

人真皮淋巴上皮细胞兔核因子κ B   英文名称：   Rabbit Nuclear factor κB   规格：      英文缩写
：   NFkB

兔骨保护素<破骨细胞抑制因子>   英文名称：   Rabbit Osteoprotegerin   规格
：      英文缩写
：   OPG

兔血小板活化因子   英文名称：   Rabbit Platelet Activating Factor   规格：      英文缩写：   PAF

兔蛋白激酶A   英文名称
：   Rabbit Protein Kinase A   规格：      英文缩写：   PKA

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月
。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用