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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞
，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养

。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性

，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称
：人外周血B淋巴细胞

英文名称
：Human Peripheral Blood B Lymphocyte Cells

组织来源：外周血

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

人外周血B淋巴分离自外周血
；B淋巴细胞的祖细胞存在于胎肝的造血细胞岛中，此后B淋巴细胞的产生和分化场所逐渐被骨髓所代替。B淋巴细胞简称B细胞，成熟的B细胞主要定居于淋巴结皮质浅层的淋巴小结和脾脏的红髓和白髓的淋巴小结内。B细胞在抗原刺激下可分化为浆细胞，浆细胞可合成和分泌抗体(免疫球蛋白)，主要执行机体的体液免疫
。与T淋巴细胞相比
，它的体积略大。这种淋巴细胞受抗原刺激后，会增殖分化出大量浆细胞。浆细胞可合成和分泌抗体并在血液中循环。从骨髓来的干细胞或前B细胞
，在迁入法氏囊或类囊器官后，逐步分化为有免疫潜能的B细胞
。成熟的B细胞经外周血迁出，进入脾脏、淋巴结，主要分布于脾小结、脾索及淋巴小结

、淋巴索及消化道粘膜下的淋巴小结中，受抗原刺激后，分化增殖为浆细胞，合成抗体
，发挥体液免疫的功能。

实验室分离的人外周血B淋巴采用取外周血、通过密度梯度离心法结合磁珠分选制备而来
，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶
。

质量检测

实验室分离的人外周血B淋巴经CD19免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV、HCV
、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基：基础培养基
，含IL-2
、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率

：每2-3天换液一次

生长特性
：悬浮

细胞形态：圆形

传代特性
：不建议传代

培养条件
：气相：空气
，95%；CO2
，5%

人外周血B淋巴体外培养周期有限
；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层

，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液
，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便
、快速,但对组织机械损伤大
，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松
，由块状变成絮状，此时再采用机械法
，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后

，细胞容易贴壁生长。

大鼠双调蛋白(AREG)检测试剂盒 
，英文名： AREG ELISA Kit

Mouse vitamin B6 (VB6) ELISA Kit 小鼠B6(VB6)检测试剂盒

RatAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 大鼠血管生成素2(ANG-2)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforh-FABP(Humanheafattyacidbindingprotein)ELISAKit人心型脂肪酸结合蛋白

细胞SRCN2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKit17-OHCS大鼠17羟皮质类固醇

M1重组甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) Matrix protein 1 / M1 蛋白 Protein

PGRN (progranulin 0.5mgPGRN (progranulin) 颗粒蛋白前体抗原

ALDH7A1重组人 ALDH7A1 / ATQ1 蛋白 Protein

CKM Protein Human 重组人 CKM / CK-MM 蛋白

CEACAM1 Protein Human 重组人 CEACAM1 / CD66a 蛋白

PGRN (progranulin 0.5mgPGRN (progranulin) 颗粒蛋白前体抗原

CKM Protein Human 重组人 CKM / CK-MM 蛋白

M1重组甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) Matrix protein 1 / M1 蛋白 Protein

CEACAM1 Protein Human 重组人 CEACAM1 / CD66a 蛋白

ALDH7A1重组人 ALDH7A1 / ATQ1 蛋白 Protein

小鼠酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human rotavirus (RV) ELISA Kit 人轮状病毒(RV)检测试剂盒

HumanOrexieceptor,OXRELISAKit 人食欲素受体(OXR)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Dolichosbifowsagglinin,DBA检测试剂盒双花扁豆凝集素(DBA)检测试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞线粒体复合物V蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

MouseE-Cadherin,E-CadELISAKit小鼠E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)检测试剂盒规格：96T/48T

人外周血B淋巴细胞小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠甲状腺球蛋白(TG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁
。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用