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细胞简介：

人乳腺癌血管周分离自乳腺癌组织；女性乳腺是由皮肤
、纤维组织、乳腺腺体和脂肪组成的，乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤
。乳腺癌中99%发生在女性
，男性仅占1%。乳腺并不是维持机体生命活动的重要器官，原位乳腺癌并不致命；但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性，细胞之间连接松散
，容易脱落
。癌细胞一旦脱落
，游离的癌细胞可以随血液或淋巴液播散全身，形成转移，危及生命。目前
，乳腺癌已成为威胁女性身心健康的常见肿瘤。周细胞（pericyte）又称Rouget细胞和壁细胞，是一种包围全身毛细血管和静脉中内皮细胞的细胞
，可以收缩。周细胞嵌入毛细血管内皮细胞的基膜中，通过物理接触和旁分泌信号与内皮细胞进行细胞通讯，监视和稳定内皮细胞的成熟过程。此外
，周细胞还具有调控毛细血管血流量、细胞碎屑清除和吞噬以及血脑屏障渗透性的作用，其多功能性是目前研究的热点之一，所以对血管周细胞的生物学特征
、标记物、细胞功能等的研究都为相关研究提供基础资料
。周细胞产生手指状的外延以调控毛细血管的血流量。周细胞和内皮细胞之间共同拥有一个基膜，基膜上有多种细胞连接，包括多种整合素
、神经钙黏素、纤连蛋白以及接合素。它还参与毛细血管直径的双向调控；毛细血管受损时，周细胞还可增殖，分化为内皮细胞和成纤维细胞。

方法简介：

公司实验室分离的人乳腺癌血管周采用胶原酶-联合消化法及不锈钢网筛过滤法结合密度梯度离心法制备而来
，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的人乳腺癌血管周经alpha-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1
、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂
、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相

：空气
，95%

；CO2
，5%

实验报告
：

一、分离与培养
：

1
、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s
，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置
，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min
，弃去上清

，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃
，5％CO2 培养箱中培养；

5
、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定
：

1
、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2
、PBS冲洗细胞2次

，每次10min
，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5
、PBS冲洗细胞3次，每次10min

，按1
：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

大鼠SHC转化蛋白1(SHC1)检测试剂盒 
，英文名
： SHC1 ELISA Kit

Mouse apoptosis inducing factor (AIF) ELISA Kit 小鼠凋亡诱导因子(AIF)检测试剂盒

ELISA 小鼠催乳素(mouse PRL)  进口分装

CLIAKitforIFN-Gamma(HumanIerferonGamma)ELISAKit人γ干扰素

通用型禽鼻气管鸟杆菌(Ornithobacteriumrhinoacheale;O)试剂盒20次

ELISAKitVD3大鼠3

CD53重组食蟹猴 CD53 蛋白 (aa 107-181, His 标签) Protein

LPLUNC1 人鼻咽癌癌基因多肽抗原 0.5mgLPLUNC1 人鼻咽癌癌基因多肽抗原

FCGR2A重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 标签), Biotinylated Protein

GSTK1 Protein Human 重组人 GSTK1 蛋白

IL2 Protein Mouse 重组小鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

LPLUNC1 人鼻咽癌癌基因多肽抗原 0.5mgLPLUNC1 人鼻咽癌癌基因多肽抗原

GSTK1 Protein Human 重组人 GSTK1 蛋白

CD53重组食蟹猴 CD53 蛋白 (aa 107-181, His 标签) Protein

IL2 Protein Mouse 重组小鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

FCGR2A重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 标签), Biotinylated Protein

小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 人3(VD3)检测试剂盒

HumanAi-OvaryAibody,AOAbELISAKit 人抗卵巢抗体(AOAb)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humancholecystokinin,CCK检测试剂盒人胆囊收缩素/肠促肽(CCK)检测试剂盒规格：96T/48T

紫外可见光分析20样本

HumanSecretinELISAKit人促胰液素/胰泌素(Secretin)检测试剂盒规格
：96T/48T

人乳腺癌血管周细胞兔抑瘤素M(OSM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔血管生成素2(ANG-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

中文名称   方法   规格

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态
、所用培养基
、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片
，是正常现象。观察好细胞状态后

，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化

，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞
，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流
。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用
。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1
：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿。