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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中
，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞
，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞

、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用
。

产品名称
：人滑膜成纤维细胞(类风湿关节炎)

英文名称：详见说明书

组织来源：滑膜

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

人滑膜成纤维(类风湿关节炎)分离自滑膜组织
；滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构

，各种关节内疾病均会累及滑膜
。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构，同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎(OA)以关节软骨退行性变为特征，其病理改变累及关节的各个组成部分，但绝不仅局限于软骨，还包括软骨下骨

、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响，相互作用
，共同加速关节的退变。滑膜细胞是构成滑膜层的大细胞群体
，是维持关节正常功能的重要组织结构，它包埋在颗粒状无定性的基质中
，基质内有分散的纤维分布。滑膜由A型(巨噬样滑膜细胞)、B型(成纤维样滑膜细胞)以及C型(树突细胞样滑膜细胞)细胞组成。类风湿关节炎(RA)是一种病因未明的慢性、以炎性滑膜炎为主的系统性疾病。其特征是手、足小关节的多关节、对称性
、侵袭性关节炎症，经常伴有关节外器官受累及血清类风湿因子阳性
，可以导致关节畸形及功能丧失
。RA的发病可能与遗传
、感染
、性激素等有关
。RA关节炎的病理主要有滑膜衬里细胞增生、间质大量炎性细胞浸润，以及微血管的新生、血管翳的形成及软骨和骨组织的破坏等

。体外培养人滑膜成纤维(类风湿关节炎)对于研究类风湿关节炎疾病的发生机理、治疗具有重要意义。

实验室分离的人滑膜成纤维(类风湿关节炎)采用混合酶消化结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶
。

质量检测

实验室分离的人滑膜成纤(类风湿关节炎)经Vimentin免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV、HCV、支原体
、细菌
、酵母和真菌等。

培养基
：含FBS、生长添加剂
、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率
：每2-3天换液一次

生长特性
：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性
：可传3-5代左右

消化液
：0.25%

培养条件
：气相：空气

，95%
；CO2，5%

人滑膜成纤维(类风湿关节炎)体外培养周期有限
；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养
，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水
、胸水或腹水的悬液材料
，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散
，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法

。

① 机械分散法

特点:简便
、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松
，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液

，接种培养后，细胞容易贴壁生长
。

大鼠组蛋白H2B(H2B)检测试剂盒 ，英文名： H2B ELISA Kit

Nude mouse alpha fetoprotein / alpha fetoprotein (AFP) ELISA Kit 裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)检测试剂盒

MouseProcalcitonin,PCTELISAKit 小鼠降钙素原(PCT)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit人淋巴细胞功能相关抗原3

土壤元素比色法定量检测试剂盒20次

ELISAKitAMA大鼠抗心肌抗体

MDH1重组大鼠 MDHA / MDH1 蛋白 Protein

HCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen 0.5mgHCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen)human 膀胱抗原

CD160重组人 CD160 蛋白 Protein

CFHR2 Protein Human 重组人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 蛋白

CSRP1 Protein Mouse 重组小鼠 CSRP1 / CSRP / CRP1 蛋白

HCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen 0.5mgHCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen)human 膀胱抗原

CFHR2 Protein Human 重组人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 蛋白

MDH1重组大鼠 MDHA / MDH1 蛋白 Protein

CSRP1 Protein Mouse 重组小鼠 CSRP1 / CSRP / CRP1 蛋白

CD160重组人 CD160 蛋白 Protein

小鼠铜蓝蛋白(CP/CER)ELISA 试剂盒 96T/48T

Kappa B subunit p65 factor - nucleus of rat affinity peptide (NF- kappa B p65) ELISA Kit 大鼠核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)检测试剂盒

Humanserineprotease,PRSSELISAKit 人丝蛋白酶(PRSS)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1检测试剂盒鸡可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)检测试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞PI-3KINASEP110BETA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

MouseFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit小鼠Ⅸ(FⅨ)检测试剂盒规格：96T/48T

人滑膜成纤维细胞(类风湿关节炎)小鼠同型半胱酸(Hcy)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠铁调素(Hepcidin)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠铁蛋白(FE)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠天门冬酸基转移酶（AST）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁
。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的
，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用