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实验报告：

一
、分离与培养：

1

、无菌条件下
，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s
，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液
，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ 
，5％CO2 培养箱中培养；

5
、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定：

1
、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5、PBS冲洗细胞3次

，每次10min
，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

细胞简介
：

方法简介：

培养信息
：

规格

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书
，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基

、血清比例、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用
。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿。

公司正在出售的产品：

实验报告：

一、分离与培养：

1
、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置
，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4

、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min
，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5
、差速贴壁1h后
，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养
；二、免疫荧光鉴定
：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基

，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2
、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3
、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗

， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次
，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

细胞简介
：

人骨髓树突状分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内
。成年动物的骨髓分两种
：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞
。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体

。因此
，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官
。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中

，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色


，称为红骨髓
。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔

，随着年龄增大
，脂肪细胞增多
，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓DC细胞是由骨髓单核细胞诱导而成的
；DC细胞，全称树突状细胞(DC)
，是近年来倍受们关注的专职抗原呈递细胞(APC)
，能摄取、加工及呈递抗原
，启动T细胞介导的免疫反应
。由美国学者Steinman于1973年在淋巴结中发现，从脾脏中分离出一类与粒细胞
、巨噬细胞和淋巴细胞形态和功都不同的白细胞
，因其细胞膜向外伸出，形成与神经细胞轴突相似的膜性树状突起，故而命名为树突状细胞。未成熟DC具有较强的迁移能力
，成熟DC能有效激活初始型T细胞
，处于启动
、调控、并维持免疫应答的中心环节。

方法简介：

公司实验室分离的人骨髓DC采用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的人骨髓树突状(DC细胞)经CD86免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1

、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 半贴半悬浮

细胞形态 树突状

传代特性 属于高度分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气，95%；CO2，5%

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养
。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系
，告知细胞的具体情况

，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞

，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 
。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿。

公司正在出售的产品
：

小鼠血清(NO)ELISA 试剂盒

One target of rapamycin (mTOR) ELISA Kit 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)检测试剂盒

Humanβ-lactamaseELISAKit 人β内酰胺酶(β-lactamase)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor(BAX)RatBcl-2associatedXprotein,BaxELISAKit大鼠Bcl-2相关X蛋白

荧光稳定/稀释溶液10毫升

MouseIerleukin16,IL-16ELISAKit小鼠白介素16(IL-16)检测试剂盒规格：96T/48T

NS2重组甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural Protein 2 / NS2 Protein

PTEN/MMAC1 一种抑制基因抗原 0.5mgPTEN/MMAC1 一种抑制基因抗原

FCGR2A重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (166 Arg, His 标签) Protein

CECR1 Protein Human 重组人 CECR1 / ADA2 蛋白

EFNA5 Protein Human 重组人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)

PTEN/MMAC1 一种抑制基因抗原 0.5mgPTEN/MMAC1 一种抑制基因抗原

CECR1 Protein Human 重组人 CECR1 / ADA2 蛋白

NS2重组甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural Protein 2 / NS2 Protein

EFNA5 Protein Human 重组人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)

FCGR2A重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (166 Arg, His 标签) Protein

小鼠脱氢表雄酮酯(DHEA-S)ELISA 试剂盒 96T/48T

One Japanese encephalitis aibody IgG (JE IgG) ELISA Kit 人流行性乙型脑抗体IgG(JE IgG)检测试剂盒

HumanBcellreceptor,BCRELISAKit 人B细胞受体(BCR)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenNuclearfactor-kappaB,NF-κB检测试剂盒鸡核因子κB(NF-κB)检测试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞P38蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

mousefollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit小鼠促卵泡素(FSH)检测试剂盒规格
：96T/48T

人骨髓树突状细胞(DC细胞)小鼠晚期糖基化终末产物检测试剂盒   小鼠晚期糖基化终末产物试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠晚期糖基化终末产物试剂盒
，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名
：小鼠晚期糖基化终末产物试剂盒、小鼠晚期糖基化终末产物eisa试剂盒   保存条件

：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体检测试剂盒   小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体试剂盒   规格型号
：96T/48T   小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体试剂盒
，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名
：小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体试剂盒、小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠检测试剂盒   小鼠试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠试剂盒，规格型号：96T/48T
，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠试剂盒
、小鼠eisa试剂盒   保存条件


：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠支原体检测试剂盒   小鼠支原体试剂盒   规格型号
：96T/48T   小鼠支原体试剂盒
，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠支原体试剂盒、小鼠支原体eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。