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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中

，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁
，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞
，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性
，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：人肝窦内皮细胞

英文名称：Human Hepatic Sinusoidal Endothelial Cells

组织来源：肝脏组织

产品规格
：5×105cells/T25细胞培养瓶

人肝窦内皮分离自肝脏组织

；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官
，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖
、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁

。肝脏是机体内脏里大的器官
，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方
，胃的上方
。肝脏是机体消化系统中大的消化腺
，为一红棕色的V字形器官

。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面
，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接
。肝窦内皮细胞（SEC）是肝脏内所占比例高的非实质细胞，位于肝窦腔与肝细胞之间
，具有物质转运、吞噬

、抗原提呈
、免疫耐受等功能。SEC由于拥有一般细胞所没有的窗孔结构、细胞间连结松散
、内皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性，从而达到快速交换各种大小分子的目的。肝在遭到多种病原侵袭时，肝窦内皮细胞窗孔逐渐减少或消失
，内皮下基膜形成，产生类似于连续型毛细血管的结构
，这一过程称为肝窦毛细血管化。它由多种因素引起，其过程极复杂
，在多种肝病的发病前期阶段均有出现，近年来受到广泛关注。

公司实验室分离的人肝窦内皮采用混合酶灌流消化、反复低速离心、密度梯度离心法，并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的人肝窦内皮经CD31、CD14免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上

，且不含有HIV-1、HBV、HCV
、支原体、细菌
、酵母和真菌等。

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS
、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气
，95%；CO2

，5%

取材→分离→培养和维持

1
、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2

、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开

，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水

、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟
。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散
，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大
，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法
，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散
，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长
。

大鼠抑制素βA(INHβA)检测试剂盒 

，英文名： INHβA ELISA Kit

Mouse immunoglobulin G (IgG) ELISA Kit 小鼠免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒

MousePlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISAkit 小鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforhumandopamine,DAELISAKIT人多巴胺

细胞ABL1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitEPO大鼠红细胞生成素

ACE2重组小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor 0.5mgAh Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor) 芳香烃受体抗原

IZUMO4重组人 IZUMO4 / C19orf36 蛋白 (Fc 标签) Protein

F7 Protein Human 重组人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白

PVRL1 Protein Rat 重组大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (Fc 标签)

Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor 0.5mgAh Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor) 芳香烃受体抗原

F7 Protein Human 重组人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白

ACE2重组小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

PVRL1 Protein Rat 重组大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (Fc 标签)

IZUMO4重组人 IZUMO4 / C19orf36 蛋白 (Fc 标签) Protein

小鼠核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)检测试剂盒  试剂盒 组装/原装

Human neuronal apoptosis inhibitory protein (NAIP) ELISA Kit 人神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)检测试剂盒

humanParathyroidhormone,PTHELISAKit 人甲状旁腺激素(PTH)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanAi-nuclearAibody,ANA检测试剂盒人抗核抗体(ANA)检测试剂盒规格：96T/48T

植物酸性蔗糖转化酶(acidinvease)总活性比色法定量检测试剂盒20次

HumanulaEsiol
，uE3ELISAKit人超敏游离雌三醇(uE3)检测试剂盒规格：96T/48T

人肝窦内皮细胞小鼠β基己糖苷酶检测试剂盒   小鼠β基己糖苷酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠β基己糖苷酶试剂盒
，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠β基己糖苷酶试剂盒
、小鼠β基己糖苷酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠前列腺酸性0酸酶检测试剂盒   小鼠前列腺酸性0酸酶试剂盒  规格型号：96T/48T   小鼠前列腺酸性0酸酶试剂盒，规格型号：96T/48T

，来源
：检测试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠前列腺酸性0酸酶试剂盒、小鼠前列腺酸性0酸酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠糖原合成酶激酶检测试剂盒   小鼠糖原合成酶激酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠糖原合成酶激酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装）
，产品别名
：小鼠糖原合成酶激酶试剂盒
、小鼠糖原合成酶激酶eisa试剂盒   保存条件
：2-8℃   保质期：6个月
。

小鼠雄烯二检测试剂盒   小鼠雄烯二试剂盒   规格型号
：96T/48T   小鼠雄烯二试剂盒
，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠雄烯二试剂盒、小鼠雄烯二eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁
。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用
，非食用