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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系
、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：人腹膜毛细血管内皮细胞

英文名称：Human Peritoneal Capillary Endothelial Cells

组织来源：腹膜组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

人腹膜毛细血管内皮分离自腹膜组织；腹膜是存在于高等脊椎动物腹腔中的一层黏膜，主要由间皮细胞和间质（结缔组织
、纤维
、毛细血管
、淋巴管）构成
，藉由结缔组织的支持所形成的一层膜状组织。腹膜包覆大部分腹腔内的器官，能分泌黏液润湿脏器的表面
，减轻脏器间的摩擦。腹腔脏器的血液

、淋巴和神经组织经由腹膜与外界相连；腹膜也具有吸收撞击保护内脏的效果。腹膜（peritoneum）为全身面积大、配布复杂的浆膜，由皮及少量结缔组织构成，薄而光滑
，呈半透明状。衬于腹、盆腔壁内表面的腹膜称为壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄层
；覆盖腹、盆腔器表面的部分称为脏腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜脏层。脏腹膜与壁腹膜互相延续、移行，共同围成不规则的潜在性腔隙，称为腹膜腔（peritoneal-cavity）
。腹膜腔是脏、壁两层腹膜之间相互移行围成的潜在性间隙。腹膜腔内有少量浆液，在脏器活动时可减少摩擦。腹膜的主要生理功能
：①分泌功能
；②吸收功能

；③再生能力；④防御功能；⑤调理功能。脏、壁腹膜都有丰富的毛细血管

，毛细血管上有不同的孔径；腹膜的毛细血管和毛细血管后静脉是进行溶质交换的主要场所。

公司实验室分离的人腹膜毛细血管内皮采用胶原酶-联合消化法结合化学试剂抑制法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来
，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的人腹膜毛细血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV
、HCV、支原体

、细菌
、酵母和真菌等。

包被条件 PLL（0.1mg/ml）
，明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气

，95%；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2
、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开
，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水

、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层
，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密

，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液
，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大
，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松
，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散
，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后

，细胞容易贴壁生长
。

大鼠促肾上腺皮质素释放激素结合蛋白(CRHBP)检测试剂盒

，英文名： CRHBP ELISA Kit

P selectin (P-S 人P选择素(P-S

Ratsolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 大鼠可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforCT-1ELISAKit大鼠心肌营养素1

细胞涂片巴氏(papanicolaou;PAP)染色试剂盒50次

RatEndomeiumAibody,EMAbELISAKit大鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)检测试剂盒规格
：96T/48T

LYPD3重组小鼠 C4.4A / LYPD3 蛋白 Protein

Alpha-Synuclein 核突触蛋白(抗原 0.5mgAlpha-Synuclein 核突触蛋白(抗原)

NLK重组人 nemo-like kinase / NLK 蛋白 (His & GST 标签) Protein

CDON Protein Human 重组人 CDON / CDO 蛋白

ENPEP Protein Rat 重组大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白 (aa 41-945, His 标签)

半乳糖凝集素9(GAL9)重组蛋白 Recombinant Galectin 9 (GAL9)

CDON Protein Human 重组人 CDON / CDO 蛋白

EGFR重组小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 (Fc 标签) Protein

IL2RA Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL2RA 蛋白

LYZL2重组人 Lysozyme 2 / LYZL2 蛋白 Protein

小鼠C(VC)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human phosphatidylinositol specific phospholipase C (PIPLC) ELISA Kit 人0酯酰肌醇特异性0酯酶C(PIPLC)检测试剂盒

Human2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPGELISAKit 人2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenLeukemiainhibitoryfactor,LIF检测试剂盒鸡白血病抑制因子(LIF)检测试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞JNK/SAPK蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

MouseGATAbindingprotein4,GATA4ELISAKit小鼠GATA结合蛋白4(GATA4)检测试剂盒规格：96T/48T

人腹膜毛细血管内皮细胞小鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

中文名称   方法   规格

小鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月
。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用