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① 组织块培养法

组织块培养是常用
、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中

，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离
，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性
，可用于重点观察细胞间的联系

、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称
：人大隐静脉内皮细胞

英文名称
：Human Great Saphenous Vein Endothelial Cells

组织来源：大隐静脉组织

产品规格


：5×105cells/T25细胞培养瓶

人大隐静脉内皮分离自大隐静脉；大隐静脉起于足背静脉弓内侧端，经内踝前方
，沿小腿内侧缘伴隐神经上行
，经股骨内侧髁后方，进入大腿内侧部
，与股内侧皮神经伴行，逐渐向前上，在耻骨结节外下方穿隐静脉裂孔，汇入股静脉，其汇入点称为隐股点。有5条属支：旋髂浅静脉

、腹壁浅静脉、外静脉、股内侧浅静脉和股外侧浅静脉，它们汇入大隐静脉的形式多样，相互间吻合丰富。大隐静脉曲张行高位结扎时
，须分别结扎
、切断各属支
，以防复发

。大隐静脉内皮细胞对维持大隐静脉动态平衡起着重要作用
。它们合成
、分泌凝血和纤溶系统的激活因子和抑制因子、影响血小板粘附和聚集的调节因子；大隐静脉内皮细胞还释放控制细胞增殖和调节血管壁紧张度的分子。

公司实验室分离的人大隐静脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法

、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的人大隐静脉内皮经CD31免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV、HCV
、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气
，95%；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件
，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液


、羊水
、胸水或腹水的悬液材料

，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟
。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层

，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液
，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)


，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法

，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

兔子内皮抑素(ES)ELISA 试剂盒

People leils binding type AFP / AFP varia 1 (AFP-L1) ELISA kit E 人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1(AFP-L1)检测试剂盒E

Humankappaimmunoglobulinlightchain,κ-IgLCELISAKit 轻链kappa抗体(κ-IgLC)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humandynamin2,DNM2检测试剂盒人发动蛋白2(DNM2)检测试剂盒规格
：96T/48T

组织N-乙酰转移酶(NAT)活性比色法定量检测试剂盒20次

HumanPeussioxin
，PTELISAKit人百日咳毒素(PT)检测试剂盒规格：96T/48T

PLK1重组小鼠 PLK1 / PLK-1 蛋白 Protein

RNA结合基元蛋白20(RBM20)重组蛋白 Recombinant RNA Binding Motif Protein 20 (RBM20)

IZUMO1重组人 IZUMO1 蛋白 Protein

CDK16 Protein Human 重组人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 标签)

IL12A Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 标签)

泛素(Ub)重组蛋白 Recombinant Ubiquitin (Ub)

CDK16 Protein Human 重组人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 标签)

PTPN11重组小鼠 SHP2 / PTPN11 蛋白 Protein

EFNA5 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白

PRKAR1A重组人 PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 蛋白 Protein

小鼠胃泌素(GT)检测试剂盒 96T/48T

Human phospholipase A2 (PL-A2) ELISA Kit 人0脂酶A2(PL-A2)检测试剂盒

HumanAmylaseELISAKit 人(Amylase)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenIerleukin17,IL-17检测试剂盒鸡白介素17(IL-17)检测试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞FSH-BETA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

MouseGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)检测试剂盒规格：96T/48T

人大隐静脉内皮细胞小鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠纤连蛋白(FN)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月
。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁
。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗
，非药用，非食用