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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长

。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞
，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：鸡小肠黏膜上皮细胞

英文名称
：Chicken Small Intestine Mucosal Epithelial Cells

组织来源：小肠组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

鸡小肠黏膜上皮分离自小肠组织
；小肠位于腹中，上端接幽门与胃相通
，下端通过阑门与大肠相连
，是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内，上连胃幽门，下接盲肠
，分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的，因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后，基本上完成了消化过程
，同时营养物质被小肠粘膜吸收了
。小肠管壁由粘膜、粘膜下层

、肌层和浆膜构成

。其结构特点是管壁有环形皱襞
，粘膜有许多绒毛，绒毛根部的上皮下陷至固有层

，形成管状的肠腺，其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切
；构成肠腺的细胞有柱状细胞
、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似
，接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似，绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短
，不形成纹状缘

。小肠有三种功能即消化
、吸收和分泌及运动功能
，其中以吸收和分泌功能为主。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力，促使食物向下运动
。肠黏膜上皮细胞是机体内外环境的重要屏障，持续暴露于大量抗原中，也是机体面对病原微生物的道防线。因此，肠黏膜上皮细胞除有吸收、分泌和转运等重要生理功能之外
，在黏膜先天性和获得性免疫防御机制中也起着重要作用。肠黏膜上皮细胞作为先接触抗原的细胞，在黏膜免疫反应的起始阶段发挥关键作用，它决定黏膜免疫反应的发生
、性质和强度。

公司实验室分离的鸡小肠黏膜上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的鸡小肠黏膜上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1

、HBV

、HCV
、支原体
、细菌、酵母和真菌等

。

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS
、生长添加剂
、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1

、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2
、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开
，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散
，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后
，细胞容易贴壁生长。

大鼠巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)检测试剂盒 ，英文名： MCSF ELISA Kit

Mouse lipoprotein associated phospholipase A2 (Lp-PL-A2) ELISA Kit 小鼠脂蛋白相关0脂酶A2(Lp-PL-A2)检测试剂盒

Rat8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit 大鼠8异前列腺素(8-iso-PG)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforFN(HumanFibronectin)ELISAKit人纤连蛋白

细胞肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次

Ratperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)检测试剂盒规格
：96T/48T

CA9重组狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 蛋白 Protein

OAT-3(Organic anion transporter 3 0.5mgOAT-3(Organic anion transporter 3) 阴离子转运蛋白-3(抗原)

CA13重组人 Carbonic Anhydrase XIII / CA13 蛋白 Protein

EIF5A2 Protein Human 重组人 EIF5A2 蛋白

CTSH Protein Mouse 重组小鼠 Cathepsin H / CTSH 蛋白

OAT-3(Organic anion transporter 3 0.5mgOAT-3(Organic anion transporter 3) 阴离子转运蛋白-3(抗原)

EIF5A2 Protein Human 重组人 EIF5A2 蛋白

CA9重组狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 蛋白 Protein

CTSH Protein Mouse 重组小鼠 Cathepsin H / CTSH 蛋白

CA13重组人 Carbonic Anhydrase XIII / CA13 蛋白 Protein

小鼠降钙素(CT)ELISA 试剂盒 96T/48T

Pigme epithelium derived factor (PEDF) ELISA Kit 人色素上皮衍生因子(PEDF)检测试剂盒

HumangranulysinELISAKit 人颗粒溶素(granulysin)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanai-doublesandedDNA,dsDNA检测试剂盒人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)检测试剂盒规格：96T/48T

植物脊髓过氧化酶(MPO)活性高质敏感(DTNB)比色法定量检测试剂盒20次

HumanXC-chemokinereceptor1,XCR1ELISAKit人XC趋化因子受体1(XCR1)检测试剂盒规格：96T/48T

鸡小肠黏膜上皮细胞小鼠释放激素   英文名称
：   Mouse Gonadoopin-Releasing Hormone   规格：      英文缩写：   GH

小鼠葡萄糖氧化酶   英文名称：   Mouse Glucose Oxidase   规格：      英文缩写：   GOD

小鼠胰高血糖素   英文名称：   Mouse Glucagon   规格
：      英文缩写
：   GC

小鼠葡萄糖60酸脱氢酶   英文名称：   Mouse Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase  规格
：      英文缩写：   G6PD

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的

，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用

，非食用