242net必赢

产品仅供研究使用
，不适用于人类或临床诊断
商品属性：

产品英文名称：Human G-CSF Protein

产品中文名称
：重组人粒细胞集落刺激因子（G-CSF）

规格：10 μg/50 μg/500 μg

货号

：EY-01X8669
用途：仅供科研研究实验

特点&优势:

标签:无标签

表达宿主:大肠杆菌

种属:人

序列:氨基酸序列来源于：人源 G-CSF（Thr31-Pro204）表达的蛋白片段。

活性:通过其诱导M-NFS-60细胞增殖的能力来测定

。该效应的ED50为0.2569 ng/mL。

蛋白长度：重组人粒细胞集落刺激因子由174个氨基酸组成，在N端有一个Met标签，预测分子质量为 18.7 kDa。

纯度:> 98 %

，使用SDS-PAGE检测

采用 LAL 法检测
，每 1 μg 蛋白质中的 EU 含量小于 1.0。

产品形式:冻干粉
，冻干缓冲液为无菌的 PB动겸动

背景

粒细胞集落刺激因子（G-CSF）是 CSF 系列糖蛋白中的一种，可调节造血细胞的增殖
、分化和功能。它是一种关键的细胞因子，参与中性粒细胞的生成，并刺激造血祖细胞形成粒细胞集落（Metcalf 和 Nicola）
。G-CSF 可产生一系列效应
，包括一过性减少 SDF-1 的表达、激活能裂解 VCAM-1 的金属蛋白酶、从交感神经系统释放，从而导致造血干细胞从骨髓释放或动员到外周。

本产品具有下列特点:

 1.操作简便、快捷。可直接加入到检测平板
。在96-孔板中检测时,无需洗涤或收获细胞,免去溶解步骤
。

2. 无放射性。不需要配制液闪混合物,也不需要处理废弃物
。

3. 与MTT相比,使用更安全
。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物。

4. 操作灵活,与MTT不同,平板读数后可放回温箱继续孵育,使颜色进一步生成。
公司正在出售的产品：

Beta-Amyloid (31-35 0.1mgBeta-Amyloid (31-35) β淀粉样肽31-35(多肽蛋白)

ACPP Protein Human 重组人 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 蛋白 (His 标签)

CADM3重组小鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 (His 标签) Protein

LIFR Protein Rat 重组大鼠 LIFR 蛋白 (His 标签)

TXNL4B重组人 Dim2 / TXNL4B 蛋白 (His 标签) Protein

植物激素脱落酸(ABA)ELISA 试剂盒

Human ai RNP aibody (RNP-Ab) ELISA Kit 人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)检测试剂盒

Porcineinsulin-likegrowthfactorsbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKit 猪胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitforAFA(Humanai-filaggrinaibody)ELISAKit人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体

血液氧化型(GSSG)浓度比色法定量检测试剂盒50次

MousesubstancePreceptor,SP-RELISAKit小鼠P物质受体(SP-R)检测试剂盒

整合素α2β1   英文名称
：   Iegrin α2β1   规格：      英文缩写
：   Iegrin α2β1

整合素α5β3   英文名称：   Iegrin α5β3   规格

：      英文缩写
：   Iegrin α5β3

β-整合素   英文名称
：   β-Iegrin   规格：      英文缩写
：   β-Iegrin

诱导型合酶   英文名称：   induced niic oxide syhas   规格：      英文缩写：   iNOS

小鼠内皮抑素(ES)ELISA 试剂盒

Rat basic fibroblast growth factor 6 (bFGF-6) ELISA Kit 大鼠碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)检测试剂盒

HumanfibrinopeptideA,FPAELISAKit 人血纤肽/纤维蛋白肽A(FPA)检测试剂盒 进口分装

Human8-epi-prostaglandinF2alpha,8-epi-PGF2α检测试剂盒人8-异构前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)检测试剂盒

正常大鼠(SpragueDawley)肝组织微粒体组分(5毫克/毫升)500微升

Mouseai-IVIgGaibodyELISAKit小鼠抗IVIgG抗体检测试剂盒

重组人粒细胞集落刺激因子（G-CSF）CADM3重组小鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 (His 标签) Protein

Beta-Amyloid (31-35 0.1mgBeta-Amyloid (31-35) β淀粉样肽31-35(多肽蛋白)

TXNL4B重组人 Dim2 / TXNL4B 蛋白 (His 标签) Protein

ACPP Protein Human 重组人 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 蛋白 (His 标签)

LIFR Protein Rat 重组大鼠 LIFR 蛋白 (His 标签)

操作步骤
：

(一)获得目的基因

1

、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。

2
、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。

(二)构建重组表达载体

1
、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。

2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体
。

(三)  获得含重组表达质粒的表达菌种

1、 将连接产物转化大肠杆菌DH5α,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。

2、 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作
。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。

3
、 以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。

(四)诱导表达

1
、挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。

2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)。

3、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr

。

4、分别取菌体1ml, 离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀, 70℃10min。

5、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析
。