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产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断
商品属性：

产品英文名称
：Hoechst 33342

产品中文名称
：Hoechst 33342

规格：10mg/100 mg

货号
：EY-01X8565
用途
：仅供科研研究实验

特点&优势:

•   λEx/λEm: 350/461 nm(结合DNA)，346/460 nm(未结合DNA)
。

产品形式黄色固体

使用中注意事项•  可溶于水

。

保存建议:-20℃
，避光保存12个月
。

运输条件:蓝冰运输

背景

Hoechst 33342是一种非嵌入性的亮蓝色荧光染料。Hoechst染料在细胞周期和凋亡研究中被广泛应用
，也被广泛应用于核复染色。

本产品具有下列特点:

 1.操作简便、快捷。可直接加入到检测平板
。在96-孔板中检测时,无需洗涤或收获细胞,免去溶解步骤
。

2. 无放射性。不需要配制液闪混合物,也不需要处理废弃物。

3. 与MTT相比,使用更安全。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物。

4. 操作灵活,与MTT不同,平板读数后可放回温箱继续孵育,使颜色进一步生成
。

操作步骤

：

(一)获得目的基因

1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。

2
、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。

(二)构建重组表达载体

1、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。

2
、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。

(三)  获得含重组表达质粒的表达菌种

1、 将连接产物转化大肠杆菌DH5α,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。

2、 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点
。

3

、 以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。

(四)诱导表达

1、挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养
。

2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)。

3、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr。

4、分别取菌体1ml, 离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀, 70℃10min。

5、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析
。

公司正在出售的产品

：

Adropin蛋白(AD)重组蛋白 Recombinant Adropin (AD)

FGF21 Protein Human 重组人 FGF21 蛋白 (His 标签)

AGRP重组小鼠 AGRP / AgRP 蛋白 (His 标签) Protein

TNF Protein Rat 重组大鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白

CCDC47重组人 CCDC47 蛋白 (His 标签) Protein

小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA 试剂盒

Rat thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 大鼠抗复合物(TAT)检测试剂盒

HumanBigEndothelin,BigETELISAKit 人大内皮素(BigET)检测试剂盒 进口分装

HumanATP-bindingcassetteanspoerG2,ABCG2检测试剂盒人腺苷三0酸结合盒转运体G2(ABCG2)检测试剂盒

植物源性食品腰果(cashew)试剂盒20次

HumahromboxaneA2,TX-A2ELISAKit人血栓素A2(TX-A2)检测试剂盒

C（VC）检测   Vitamin B2 (VB2) detection

B1（VB1）检测   The total amino acid (TAA) detection

B2（VB2）检测   Detection of malic dehydrogenase

总基酸（T－AA）检测   Hydroxyproline sample preeatme

大鼠无翅型MMTV整合位点家族成员5A(W5A)检测试剂盒 
，英文名
： W5A ELISA Kit

Mouse eosinophil chemotactic protein Eotaxin 1 (Eotaxin 1/CCL11) ELISA Kit 小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)检测试剂盒

MouseCXC-chemokinereceptor3,CXCR3ELISAKit 小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitforHSP-20ELISAKit大鼠热休克蛋白20

细胞MSK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitIL-12/P40大鼠白介素12

Hoechst 33342AGRP重组小鼠 AGRP / AgRP 蛋白 (His 标签) Protein

Adropin蛋白(AD)重组蛋白 Recombinant Adropin (AD)

CCDC47重组人 CCDC47 蛋白 (His 标签) Protein

FGF21 Protein Human 重组人 FGF21 蛋白 (His 标签)

TNF Protein Rat 重组大鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白