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培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净

，不要用纱布
； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时
； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测
。 

下列是产品的订购信息

：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中

，根据要求可始终保持细胞活力
，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况
，包括活细胞的形态、结构
、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气
、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时
，可以施加化学、物理

、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞
，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化
。
4.研究内容便于观察
、检测和记录
采用各种研究技术
：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学
、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
​
实验要点及说明
：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养
，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃
，并经过铬酸洗液处理
； 
3．盖玻片非常薄
，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率
； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干

。

细胞培养方法：
1、细胞传代
：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞
，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化
；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止
；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min

，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中
，T25培养瓶加6-8ml培养基
；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏
：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右
，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀
，将细胞悬液加入培养瓶中
，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次
，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后
，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

2-甲-6-乙吡
：119.162- methyl -6- vinyl pyridine
：1122-70-9 C8H9N

5--1,2,3-噻二唑：101.135- -1,2,3- two：4100-41-8 C2H3N3S

5-喹哪
：158.25- amino group
：54408-50-3 C10H10N2

连翘苷Phillyrin：534.55C27H34O11：487-41-2

4-(6-氯-3-哒嗪)啉：199.644- (6- -3-) Ma Lan：17259-32-4 C8H10ClN3O

1,5-二羟萘
：160.171,5- two hydroxy naphthalene：83-56-7 C10H8O2

碱式铝

：162.08Basic aluminum acetate：142-03-0 Al(OH)C4H6O4； Al(OH)(CH3COO)2

二甲臢新四唑：598.71Two new triazole formazen：21520-87-6 C38H30N8

DBD-COCl


：332.76DBD-COCl：156153-43-4 C11H13ClN4O4S

SW116细胞
，人大肠癌细胞说明书小鼠 ANGPT2 / ANG2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签

人 PPP2R3B 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

人 PDGF-C / SCDGF 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠 TREM2 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

人 NGF 基因全长ORF克隆 (表达载体)

人 VNN1 / Vanin-1 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠 CDH5 / CD144 / VE-Cad 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

大鼠 SERPINC1 基因全长ORF克隆

人 THBS2 基因全长ORF克隆

人 GOLM1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签

小鼠 SIRT3 基因全长ORF克隆

人 CD33 / Siglec-3 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)