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培养操作步骤

：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）
； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中
，使盖玻片*浸在培养液中

； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片

，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测
。 

下列是产品的订购信息
：

细胞培养的优点
：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中
，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态
、结构、生命活动等
。
2.研究条件可以人为控制
pH
、温度
、氧气
、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制
，同时，可以施加化学
、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察
，这些因素同样可以处于严格控制之下

。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞
，需要时

，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化

。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜
、电子显微镜
、流式细胞术、激光共焦显微镜
、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
。
​
实验要点及说明
：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄
，易碎


，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿
，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差


，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

细胞培养方法：
1、细胞传代
：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次
；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止
；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清
；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中
。
2、细胞复苏
：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右
，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀
，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后
，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化

；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞
；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存

。

伊立康 CAS 100286-90-6 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

延胡索甲素 CAS 518-69-4 规格：20mg 订购|咨询

川射干 CAS  规格：1g 订购|咨询

桑皮苷A CAS 102841-42-9 规格
：20mg 订购|咨询

竹叶柴胡 CAS  规格
：5.0g 订购|咨询

丹皮酚;Paeol CAS 552-41-0 规格：200mg 订购|咨询

天南星 CAS  规格：1g 订购|咨询

利福布汀 CAS  规格：100mg 订购|咨询

苹果酸 CAS 6915-15-7 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

具栖冬青苷 CAS 42719-32-4 规格
：HPLC≥98%；20mg/vial 订购|咨询

乙肝表面（HBs）抗体免疫球蛋白 CAS  规格：2.5IU/支
，0.5ml/支 订购|咨询

HS-1细胞
，人皮肤癌细胞系供应商异硫氰酸荧光素(FITC)标记糖尿病相关肽1-37Amylin1-37/FITC 1ml

凋亡蛋白活性因子-1（抗原）Apaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1)(CT) 0.5mg

凋亡蛋白活性因子-1（抗原）Apaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1)(NT) 0.5mg

雄激素受体（多肽抗原）AR (Androgen Receptor)peptide 0.5mg

5-羟色胺受体2A抗原5-HTR2A 0.5mg

5-羟色胺受体3抗原5-HTR3(5-hydroxytryptamine (serotonin) receptor 3a) 0.5mg

Ⅱ(II)抗原thrombin/Prothrombin 1mg

5-羟色胺受体4抗原5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4) 0.5mg

粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗原Muc2 peptide 0.5mg

整合素样金属蛋白酶与1型-7抗原ADAMTS7 peptide 0.5mg

血管紧张素原（抗原）AT (Angiotenogen) 0.5mg