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参数规格：

储存条件

：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后
，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆
：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物
。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存
：如果样本收集后不及时检测
，请按一次用量分装，冻存于-20℃
，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
​
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素

。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二
、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例
。由于标准品浓度非常高
，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行
，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6
，5，4，3，2 和 1 号
。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头

，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍
，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)
，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头
，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中
，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步）
，每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴
，绘制标准曲线
。 
检测步骤：
一
、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)

，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s
。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表
：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL
，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团
：设置为FAM。淬灭基团
：NONE，请勿选择ROX参比荧光

。

间溴三氟甲：225.01Between three fluorine toluene
：401-78-5 C7H4BrF3

1,2,4,5-四溴-3,6-二(五溴氧)：1366.851,2,4,5- four -3,6- two (five bromo methoxy benzene bromobenzene)：58965-66-5 C18Br14O2

2-氯噻唑
：119.572- 2-chloro-thiazole：3034-52-4 C3H2ClNS

4-羟咔唑：183.214- hydroxy carbazole
：52602-39-8 C12H9NO

盐酸吖：115.56Acridine hydrochloride：17784-47-3 C13H9N·HCl

2,3-二氟吡：154.142,3- two


：1481-27-2 C8H7FO2

2,4,5-三氯联2,4,5- three - - - - - - - - - -：257.54 C12H7Cl3
：16606-02-3

1,6-二羟萘：160.171,6- two hydroxy naphthalene
：575-44-0 C10H8O2

知母提取物Rhizoma anemarrhenae extract：：

兔粘液瘤病毒LAMP试剂盒人 DYRK4 基因全长ORF克隆

人 KNG1 / Kininogen 1 ELISA配对抗体

小鼠 LGALS1 基因全长ORF克隆

人 CD95 / Fas / TNFRSF6 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

甲型流感 H1N1 (California/04/2009) 神经氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 基因全长ORF克隆 (密码子优化)(表达载体), 无标签

人 EDARADD 基因全长ORF克隆

小鼠 CDC2 Kinase / CDK1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

大鼠 IL1RN / IL1F3 基因全长ORF克隆

人 EphB2 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

人 NPVF 基因全长ORF克隆

重组人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (Fc 标签)

食蟹猴 SerpinC1 / AntithrombinIII / ATIII 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)