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三、提供全程技术指导。

小鼠载脂蛋白B100（ApoB100）DRGelisa试剂盒 Mouse ApoB100 ELISA Kit
ApoB100 DRGelisa试剂盒说明书【实验用途】S-100蛋白是一组低分子量的钙结合蛋白，因其在中性饱和硫酸铵中溶解而得名
。目前
，共发现约20种结构与功能相似、存在于不同组织、可调节细胞内和细胞外Ca2+的S-100蛋白

。其中S-100B蛋白是一种分子量为21 ku的酸性蛋白

，其为由2个β亚单位组成的二聚体，经肾脏清除，半衰期约2 h
；它在脑组织中含量丰富

，远高于其他组织。S-100B具有广泛的生物学活性，在细胞增生
、分化、基因表达
、细胞凋亡中具有重要作用，但其生理意义尚未*阐明
。正常情况下，S-100B蛋白不能通过血-脑屏障进入血液，但在一些病理情况下可检测到血清S-100B升高。目前，关于S-100B蛋白通过血-脑屏障的确切机制仍不清楚。研究表明：S-100B可作为恶性色素瘤的辅助诊断和疗效评价指标，以及一些神经系统疾病的检测指标。近年来，S-100B被广泛应用于评价脑外伤、脑出血
、缺血性脑血管病

、麻醉、休克等引起的脑损伤
。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒（ELISA）。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体
，经（biotin）标记。样品和标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。
​
操作流程：
（1）ApoB100 DRGelisa试剂盒说明书待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔
；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟
，间歇摇动
。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内
，孵育60min。 
（6）洗板
，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl
。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内
，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应
。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2
，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值

。S/N≥2.1为阳性判定标准。
试剂盒组成及试剂配制 ：
1.ApoB100 DRGelisa试剂盒说明书 酶联板（Assay plate ）
：一块（96孔）
。 
2. 标准品（Standard）
：2瓶（冻干品）。
3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶
4. 标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）
：1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1
：100）
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1
：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍
。 
10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
pDdGal-17(pDdGal17)  *

pDendra2  *

pDendra2-C（pDendra2C）  *

pDendra2-N（pDendra2N）  *

pDest-544(pDest544)  *

pDEST10  *

pDEST15 Gateway（pDEST15Gateway）  *

pDEST17（60908-2416）  *

pDEST20（60908-2417）  *

pDEST22 （60908-2418）  *

pDEST26  *

pDEST27  *
[Ile-Ser]-Bradykinin (T-Kinin)Ile-Ser-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg

[Leu116]-Prepro-Neuromedin U (104-136) (human)Phe-Leu-Phe-His-Tyr-Ser-Lys-Thr-Gln-Lys-Leu-Gly-Leu-Ser-Asn-Val-Val-Ser-Ser-Val-Val-His-Pro-Leu-Leu-Gln-Leu-Val-Pro-His-Leu-His-Glu

[Leu13] Motilin, human, porcinePhe-Val-Pro-Ile-Phe-Thr-Tyr-Gly-Glu-Leu-Gln-Arg-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly-Gln

[Leu144, Arg147]-PLP (139-151), [L144, R147-PLP(139-151)]His-Ser-Leu-Gly-Lys-Leu-Leu-Gly-Arg-Pro-Asp-Lys-Phe

[Leu144,Arg147]-Myelin Proteolipid Protein(139-151)Ser-His-Leu-Gly-Lys-Leu-Leu-Gly-Arg-Pro-Asp-Lys-Phe

[Leu144]-PLP (139-151), L144-PLP(139-151)His-Ser-Leu-Gly-Lys-Leu-Leu-Gly-His-Pro-Asp-Lys-Phe

[Leu15]-Gastrin I (human)Pyr-Gly-Pro-Trp-Leu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Ala-Tyr-Gly-Trp-Leu-Asp-Phe-NH2

[Leu31,Pro34]-Neuropeptide Y (13-36) (human, rat)Pro-Ala-Glu-Asp-Met-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Leu-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2

[Leu31,Pro34]-Neuropeptide Y (human, rat)Tyr-Pro-Ser-Lys-Pro-Asp-Asn-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Pro-Ala-Glu-Asp-Met-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Leu-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2

[Leu31,Pro34]-Neuropeptide Y (porcine)Tyr-Pro-Ser-Lys-Pro-Asp-Asn-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Pro-Ala-Glu-Asp-Leu-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Leu-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2

[Leu31,Pro34]-Peptide YY (human)Tyr-Pro-Ile-Lys-Pro-Glu-Ala-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Ser-Pro-Glu-Glu-Leu-Asn-Arg-Tyr-Tyr-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Tyr-Leu-Asn-Leu-Leu-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2
ApoB100 DRGelisa试剂盒说明书大肠杆菌DH5α感受态细胞   *

大肠杆菌DH10B感受态细胞   *

大肠杆菌DH10B感受态细胞   *

大肠杆菌DH10B电感受态细胞   *

大肠杆菌DH10感受态细胞   *

大肠杆菌DH10Bac感受态细胞   *

大肠杆菌DH10Bac感受态细胞   *

大肠杆菌DB3.1感受态细胞   *

大肠杆菌DB3.1感受态细胞   *

大肠杆菌BL21感受态细胞   *