产品名称：猴病毒5RT-LAMP试剂盒
产品特点 ：猴病毒5RT-LAMP试剂盒上海242net必赢生物相关产品 ：DNA断裂因子抗体（蛋白酶激活脱氧核糖核酸酶） 英文名称：DFFB 0.2ml脱氧核糖核酸酶γ抗体 英文名称 ：DNase gamma 0.2ml死亡相关转录因子1抗体 英文名称：DATF1 0.1ml脱氧核糖核酸酶1抗体 英文名称：DNase I 0.1ml细胞死亡防卫蛋白1抗体 英文名称：DAD1 0.2ml
产品型号：50次
更新日期：2021-03-09
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50次猴病毒5RT-LAMP试剂盒的详细资料：
储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激 ，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液 ：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清 。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻 。
参数规格：
产品名称 | 猴病毒5RT-LAMP试剂盒 |
英文名称 | Monkey virus 5rt-lamp Kit |
规格 | 50次 |
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意 ：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素 。如果不能很好纯化样品 DNA ，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二 、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高 ，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行 ，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分） 。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照 ，只提供没有传染性的 、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照 。
1. 标记 6 个离心管 ，分别为 6 ，5，4，3 ，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头 ，下同） 。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注 ：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL ，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得) ，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照 。
5. 换枪头 ，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照 。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值 ，并以之为纵轴 ，以浓度的对数值为横轴 ，绘制标准曲线。
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX) ，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照) ，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量 ，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团 ：设置为FAM 。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
栀子 CAS 规格：1g 订购|咨询
龙胆花 CAS 规格：0.5g 订购|咨询
CAS 26833-87-4 规格 ：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
羟基积雪草酸 CAS 18449-41-7 规格 ：20mg 订购|咨询
CAS 规格：200mg 订购|咨询
紫金龙 CAS 规格 ：0.5g 订购|咨询
CAS 23828-92-4 规格 ：100mg 订购|咨询
橙皮素 CAS 520-33-2 规格：20mg 订购|咨询
噻 CAS 规格：50mg 订购|咨询
二苯乙烯苷;tetrahydroxyl CAS 82373-94-2 规格：20mg 订购|咨询
酸枣仁皂苷B CAS 55466-05-2 规格：20mg 订购|咨询
猴病毒5RT-LAMP试剂盒脑发育调节蛋白抗体 英文名称：Drebrin 0.2ml
DNA断裂因子抗体（蛋白酶激活脱氧核糖核酸酶） 英文名称 ：DFFB 0.2ml
脱氧核糖核酸酶γ抗体 英文名称 ：DNase gamma 0.2ml
死亡相关转录因子1抗体 英文名称：DATF1 0.1ml
脱氧核糖核酸酶1抗体 英文名称：DNase I 0.1ml
细胞死亡防卫蛋白1抗体 英文名称：DAD1 0.2ml
脱氧核糖核酸酶2抗体 英文名称 ：DNase II 0.2ml
Duffy血型趋化因子受体抗体 英文名称：DARC 0.2ml
DEK癌基因结合蛋白 英文名称 ：DEK 0.1ml
PSD95结合蛋白1抗体 英文名称 ：DLGAP1 0.2ml
PSD95结合蛋白2抗体 英文名称 ：DLGAP2 0.2ml
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