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产品名称
：蛋白酶抑制剂2ELIS检测试剂盒
英文名称：serine protease inhibitor 2
产品货号
：EY-E97475
产品规格：48T/96T
产品保存：2-8℃，有效期6个月
主要组成成分：试剂 
    性状
：液体 
    产品规格：96T/48T 
    96T指可以做94个标本，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本
，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本：体液，血清，血浆，细胞培养上清液，尿液

，组织匀浆,心房水标本等等。 

样品收集
、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管
。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA
、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎
。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用
，应将其分成小部分-70 ℃保存
，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血
。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻
。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻
。
注意事项
1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温
。稀稀过后的标准品应丢弃
，不可保存

。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中

，密封保存
，以免变质
。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好
。不同批号的试剂不要混用
。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品
。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触
，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致
，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

Poly-L-Lysine 多聚-L-赖氨酸(3-7万) 25mg  支

钙荧光探针Fura-2, AM 1 mg  支

细胞铲子 1.9cm  个

Papain 木瓜蛋白酶 25g  瓶

Uricase 尿酸酶 500U  瓶

RPMI Medium 1640 (含双抗和酚红) 500ml  瓶

soy bean flour 大豆粉（发酵） 500g  瓶

Methyl Orange 甲橙 5g  瓶

γ-Mangostin γ-倒捻子素 31271-07-5  20mg

羊抗牛IgG 1mg  支

N-Acety-L-Cysteine N-乙酰-L-半 5g  瓶

20×DAB显色液 A液和B液各3ml 3ml  瓶

蛋白酶抑制剂2ELIS检测试剂盒Smad4抗原Smad4(Mothers against decapentaplegic homolog 4) 0.5mg

Smad 7(多肽)Smad7(Mothers against decapentaplegic homolog 7) 0.5mg

磷酸化SMAD(p-Ser425)抗原phosphor-SMAD(p-Ser425)、phosphor-Mothers against decapentaplegic 0.5mg

突触相关膜蛋白25抗原SNAP-25 (synaptosomal-associated protein 25) 0.5mg

Snail蛋白抗原Snail 0.5mg

超氧化物歧化酶1抗原SOD1(superoxide-dimutase-1) 0.5mg

细胞因子信号传导抑制蛋白3抗原Socs 3 (suppressor of cytokine signaling 3) 0.5mg

超氧化物歧化酶2抗原SOD2 (superoxide-dimutase-2) 0.5ml

抗原Somatostatin/GRIH 0.5mg

胚胎干细胞关键蛋白Sox2 0.5mg

SP1转录生长因子抗原TSFP1/SP1(transcription factor Sp1) 0.5mg

ELISA 试验时
，注意事项如下： 
     1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件
，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清
、兔血清或BSA等封闭
。 
     2. 在ELISA中
，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体

，如聚氯乙烯
、聚苯乙烯
、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板
、试管
、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体
，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被
，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性
，据此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时
，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时
。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定
：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后
，在其它试验条件相同时
，观察阳性标本的OD值
。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml
。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）
。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择

：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色
。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用
，应注意防护。有条件者应使用不致癌
、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应
。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜
。底物使用液必须新鲜配制
，尤其是H2O2在临用前加入 。