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注意事项
1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃
，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好
。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A
、B液时
，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品

。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水
。
7）底物A应挥发
，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触
，有毒

。实验完成后应立即读取OD值
。
8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

产品名称
：抑癌基因Beclin1ELIS检测试剂盒
英文名称：Beclin 1
产品货号：EY-E97474
产品规格：48T/96T
产品保存
：2-8℃，有效期6个月
主要组成成分
：试剂 
    性状
：液体 
    产品规格：96T/48T 
    96T指可以做94个标本，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本

：体液，血清，血浆，细胞培养上清液，尿液，组织匀浆,心房水标本等等。 

样品收集
、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激
。使用不含热原和内毒素的试管
。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测
。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎

。1000×g离心10分钟
，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血
。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

醋酸洗必泰（醋酸己定） 25g  瓶

Calcium Chloride 化钙 500g  瓶

DL-Aspartic acid DL-天 25g  瓶

Solar Fluor 647（效果同Alexa Fluor 647）琥珀酰亚胺酯 1 mg  支

6-Aminocaproic acid 6-氨基正己酸 25g  瓶

Heparin Sepharose 6FF 肝素-琼脂糖凝胶 6FF 25mL  瓶

Sarcosine Oxidase 肌氨酸氧化酶 1KU  瓶

Polygalacturonic acid sodium salt 多聚半糖醛酸钠盐 1g  瓶

Yeast Extract 酵母膏 500g  瓶

25cm2正方斜口透气培养瓶 20个  包

NAD+ 氧化型辅酶Ⅰ 250mg  支

Insulin 牛胰岛素 25mg  支

抑癌基因Beclin1ELIS检测试剂盒蛋白磷酸酶2抗原SHP2 peptide 0.5mg

运动神经元存活蛋白结合蛋白1抗原SIP1 peptide 0.5mg

沉默调节蛋白1抗原SIRT1(sirtuin 1) 0.5mg

细胞S相激酶相关蛋白抗原Skp2 peptide 0.5mg

协同转运蛋白4-A4SLC4A4(solute carrier family 4:sodium bicarbonate cotransporter NBC1) 0.5mg

线粒体促凋亡蛋白抗原Smac/DIABLO(the second mitochondrial activator of caspase) 0.5mg

协同转运蛋白4-A7抗原Slc4a7/Nbcn1(solute carrier family 4, sodium bicarbonate cotransporter, member 7) 0.5mg

乙酰辅酶A转运蛋白1抗原SLC33A1(Acetyl-coenzyme A transportor 1) 0.5mg

磷酸钠协同转运蛋白抗原SLC34A2/NaPi-2b(Solute carrier family 34 member 2) 0.5mg

运动神经元生存蛋白1抗原SMN1(survival of motor neuron 1) 0.5mg

磷酸化Smad2抗原phospho-Smad2(p-Ser465)petide 0.5mg

ELISA 试验时，注意事项如下

： 
     1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份
，以保证实验结果的准确性
。有时本底较高
，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。 
     2. 在ELISA中
，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体

，如聚氯乙烯、聚苯乙烯
、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体
，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被
，在同一实验条件下进行反应
，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时

，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间
。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定
：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后
，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择
：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）
。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜
。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入 。