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细胞简介：

肾是脊椎动物的一种器官，属于泌尿系统的一部分，负责过滤血液中的杂质、维持体液和电解质的平衡
，后产生尿液经尿道排出体外；同时也具备的功能以调节血压。

周细胞是一种包围全身和静脉中内皮细胞的细胞
，可以收缩。周细胞产生手指状的外延以调控的血流量。周细胞和内皮细胞之间共同拥有一个基膜，基膜上有多种细胞连接，包括多种整合素、神经钙黏素、纤连蛋白以及接合。

细胞特性：

1）组织来源于实验动物的正常肾组织

。

2)细胞鉴定

：平滑肌肌动蛋白（α-SMA）荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1
、 HBV、HCV、支原体、、酵母和
。

5)细胞生长方式：长梭形细胞
，不规则细胞，贴壁培养
。

推荐培养基：

242net必赢推荐使用 DELF原代周细胞培养体系 作为该细胞的培养基。

实验报告：

一、分离与培养
：

1

、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清

，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液

，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养
；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定
：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时
，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2
、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜

；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6
、用PBS冲洗3次
，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好
，培养液是否有漏液
、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息

，如细胞形态
、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态
。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系
，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1
：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。

公司正在出售的产品：

BrdU标记法细胞繁殖比色法定量检测试剂盒

小鼠神经调节素4(NRG4)elisa检测试剂盒

大鼠S转移酶(GSTs)elisa分析检测试剂盒

组织基质金属（MMP-7）活性荧光定量检测试剂盒

人分泌型磷脂酶A2(sPLA2)elisa分析检测试剂盒

山羊甲状腺素(T4)elisa检测试剂盒免费代测

乳品三聚氰胺快速显色定性检测试剂盒（家用型/工业型）

活体细胞线粒体膜通道孔（MPTP）红色荧光（TMRM）检测试剂盒

大鼠脂多糖（LPS）elisa检测试剂盒

味觉2受体成员13抗体 T2R13

细胞骨架结合蛋白2抗体 TWF2

Src家族相关磷酸化蛋白2抗体 SCAP2

TRIM38蛋白抗体 TRIM38

AF680标记的山羊抗人乙肝表面抗原抗体 HBsAg, Alexa Fluor 680 conjugated

AF750标记的抑制肌原调节蛋白1抗体 MDFI, Alexa Fluor 750 conjugated

紧密连接蛋白23抗体 Claudin 23

卷曲螺旋结构域蛋白124抗体 CCDC124

原钙粘蛋白γA11抗体 PCDHGA11

粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗体 MUC2

分泌型卷曲相关蛋白1抗体 SFRP1

富含脯蛋白12抗体 PRR12

G蛋白偶联受体γ14抗体 G gamma14

HRP标记的核纤层蛋白A抗体 Lamin A/C, HRP conjugated

II)重链抗体 Thrombin heavy chain

趋化因子受体1重组兔单克隆抗体 CX3CR1

人blca-4 elisa检测试剂盒

丝蛋白酶抑制剂B3抗体  Anti-SERPINB3

PE-Cy5.5标记的小鼠抗兔IgM

Mouse Anti-Rabbit IgM / PE-Cy5.5

小鼠肾周细胞唾液酸结合性球蛋白样凝集素14抗体