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细胞简介：

输卵管是卵子运输、储存、获能，以及卵母细胞采取
、运送

、成熟
、受精和早期胚胎发育的重要场所。输卵管与其他空腔器官相似，其管壁由内向外为粘膜层 (tunica mucosa)、肌层(muscular layer)和浆膜层所构成。其中，肌层的结构和厚度因不同节段而有差异，峡部肌层厚

，管腔亦小
。

细胞特性
：

1）组织来源于实验动物的正常输卵管组织
。

2)细胞鉴定：平滑肌肌动蛋白（α-SMA）荧光染色为阳性
。

3)经鉴定细胞纯度高于90%
。

4)不含有 HIV-1
、 HBV、HCV、支原体
、
、酵母和。

5)细胞生长方式：梭形细胞，不规则细胞
，贴壁培养。

推荐培养基：

242net必赢推荐使用 DELF原代 平滑肌 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。

实验报告

：

一、分离与培养：

1
、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小
；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min

，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃

，5％CO2 培养箱中培养
；

5
、差速贴壁1h后
，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基

，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min


，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗
，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5
、PBS冲洗细胞3次
，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6
、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好
，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等

，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min


，弃上清

。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养
。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流
。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系

，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决

。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。

公司正在出售的产品：

小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)elisa分析检测试剂盒

人白介素-15（IL-15）elisa检测试剂盒

组织甲羟戊酸激酶（mevalsonate kinase）活性比色法

C(VC)elisa检测试剂盒

大鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)elisa分析检测试剂盒

兔1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)elisa检测试剂盒

乳糖酵解溴百里酚蓝（BTB）琼脂平板

小鼠组织蛋白酶S(CTSS)elisa检测试剂盒

大鼠前列环素(PGI2)elisa检测试剂盒

HEAT重复内含蛋白5A蛋白抗体 HEATR5A

IQSEC2抗体 IQSEC2

配体依赖核受体共抑制因子样蛋白抗体 LCORL

桥粒糖蛋白1/2抗体 Desmocollin 1 + 2

富含半胱的酸性分泌蛋白抗体 SPARC

钙结合蛋白抗体 Calretinin

抑癌蛋白UBIAD1抗体 SCCD

载脂蛋白AI调节蛋白1抗体 NR2F1/NR2F2

TSN蛋白抗体 Translin

ZCCHC5蛋白抗体 ZCCHC5

维甲酸诱导蛋白16抗体 RAI16

细胞分裂周期蛋白42重组兔单克隆抗体 Cdc42

卷曲螺旋结构域蛋白52抗体 CCDC52

跨膜蛋白6超家族成员1抗体 TM6SF1

AF680标记的卷曲螺旋结构域蛋白98抗体 CCDC98, Alexa Fluor 680 conjugated

ATP结合蛋白家族5抗体 ABCB5

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解旋酶SNF2L抗体  Anti-SMARCA1/SNF2L

PE-Cy3标记的驴抗人IgG H&L

Donkey Anti-Human IgG H&L / PE-Cy3

小鼠输卵管平滑肌细胞锌指蛋白ZBTB3抗体