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细胞简介
：

胆囊，是位于右方肋骨下肝脏后方的梨形囊袋构造
，有浓缩和储存胆汁之作用
。胆囊壁由粘膜

、肌层和外膜三层组成
。其中，外膜层主要由成纤维细胞构成。

细胞特性：

1）细胞来源于人正常胆囊组织
。

2)细胞鉴定：波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性
。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV
、支原体
、、酵母和。

5)细胞生长方式
：长梭形，不规则细胞
，贴壁培养。

推荐培养基：

242net必赢推荐使用 Delf原代成纤维细胞培养体系 作为体外培养的培养基

。

实验报告
：

一、分离与培养
：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3

、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min
，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶

，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养

；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养
；二
、免疫荧光鉴定
：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时
，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗

，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次
，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品
：

SDF-1/CXCL12ELISAkit

IAH1蛋白抗体

IAH1

乳腺癌膜蛋白11/前梯度源蛋白3抗体

BCMP11

豚鼠白介素17(IL-17)elisa检测试剂盒

化妆品糖精（saccharin）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒

1.00671011110113E+19

钙Ca测试盒带标准 30管/25样 96T 比色法（手工

MEIG1蛋白抗体

MEIG1

细胞周期蛋白3抗体

DNAJA2

结构蛋白家族3抗体  Anti-TCTN3/TECT3

RAS相关蛋白Rab5B抗体  Anti-Rab5b

神经肿瘤Nova1抗原抗体  Anti-Nova1

磷酸化血管内皮生长因子受体2抗体  Anti- phospho-VEGFR2(Tyr951)

TOM1蛋白抗体

TOM1

线粒体核糖体蛋白L38抗体

MRPL38

电压门控钠通道5α抗体  Anti-Nav1.5/SCN5A

骨桥蛋白抗体(分泌型磷蛋白1)人  Anti-OPN/BSP

Patched/PTCH抗体  Anti-Patched/PTCH

甲状腺转录因子-2抗体  Anti-TTF-2/FOXE1

大鼠IgM（亲和纯化)

MARCKS样蛋白1抗体

MARCKSL1

19号染色体开放阅读框24抗体

人胆囊成纤维细胞C19orf24

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态
、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清

。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因
，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和242net必赢联系
，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用
。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1
：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿

。不是1个T25瓶传2个10cm皿。