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细胞简介
：

胆囊，是位于右方肋骨下肝脏后方的梨形囊袋构造，有浓缩和储存胆汁之作用。胆囊壁由粘膜、肌层和外膜三层组成
。胆囊内面以粘膜覆盖，有发达的皱襞
。胆囊收缩排空时，皱襞高大而分支
；胆囊充盈时，皱襞减少变矮。粘膜上皮为单层柱状，内分散分部着少量杯状细胞
。胆囊粘膜细胞具有典型的吸收型细胞的特征，具有较强的吸收和浓缩功能，上皮细胞吸收胆汁中的水和无机盐，经细胞侧面的质膜转运至上皮细胞间隙内，吸收的水和无机盐通过基膜进入固有层的血管和管内
。同时，胆囊粘膜亦有分泌功能，分泌粘液。

细胞特性
：

1）细胞来源于人正常胆囊组织。

2)细胞鉴定
：细胞角蛋白19（CK-19）荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV


、HCV、支原体

、
、酵母和。

5)细胞生长方式：上皮样
，多角形细胞
，贴壁培养
。

推荐培养基：

242net必赢推荐使用 delf原代上皮细胞培养体系 作为体外培养的培养基。

实验报告
：

一、分离与培养：

1
、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s
，置37℃条件下消化10min
，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶

，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养
；

5
、差速贴壁1h后
，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养
；二、免疫荧光鉴定：

1
、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3
、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min
；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗
，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次
，每次10min
，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h
；

6

、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基
、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态
。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片
，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min

，，用新鲜的*培养基重悬细胞
，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养

。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流

。由于运输的原因

，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况
，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿

。

公司正在出售的产品：

大鼠肾酶(RNLS)检测试剂盒
，英文名： RNLS ELISA Kit

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：96T/48T

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APOM重组人 APOM 蛋白 (Fc 标签) Protein

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DDR1 Protein Rat 重组大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白

Beta-casein( Beta-casein 0.5mgBeta-casein( Beta-casein) β-酪蛋白(抗原)

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BCHE重组小鼠 BCHE / Butyrylcholinesterase 蛋白 Protein

DDR1 Protein Rat 重组大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白

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小鼠A(CsA)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat phosphorylated exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 大鼠0酸化细胞外信号调节激酶(pERK)检测试剂盒

humanprolactin,PRLELISAKit 人催乳素(PRL)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanai-myelinaibodyIgA,AMAIgA检测试剂盒人抗突变型瓜波形蛋白抗体(MCV)检测试剂盒规格
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植物同还原酶(aldo-ketoreductase)总活性比色法定量检测试剂盒20次

Humanuridinedipho-sphateglucuronosylansferase2familypolypeptideB4,UGT2B4ELISAKit人二0酸尿核苷葡糖酸基转移酶2家族肽B4(UGT2B4)检测试剂盒规格
：96T/48T

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