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细胞简介：

颈位于下部，近似圆锥体，长 2.5～75px，上端与体相连，下端深入。宫颈的大小与宫体比例随年龄及状态等而变化
。宫颈壁由黏膜

、肌层和外膜组成
。其中，肌层是由平滑肌细胞构成。

细胞特性
：

1）细胞来源于人正常组织。

2)细胞鉴定
：α-SMA荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1
、 HBV、HCV、支原体、、酵母和
。

5)细胞生长方式
：长梭形，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

242net必赢推荐使用 Delf原代平滑肌细胞培养体系 作为体外培养的培养基。

实验报告：

一
、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置
；

3

、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次

，直至组织被消化；

4

、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养
；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时


，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2
、PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min
；

4

、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次
，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品
：

IFI16/p16ELISAKit

鱼白三烯B4(LTB4)elisa分析检测试剂盒

LT-B4 ELISA Kit

人丙二酸单酰malonyl CoA)elisa分析检测试剂盒

HumanmalonylcoenzymeAELISAKit

细胞周期蛋白SG2N抗体  Anti-Striatin 3/SG2NA

环指蛋白213  Anti-RNF213

神经元钙结合相关蛋白EFCBP1抗体  Anti-NECAB1/EF-CBP1

DNA补充修复XPC细胞蛋白抗体  Anti-XPC

脂多糖结合蛋白抗体

LBP

卵黄状黄斑病蛋白2抗体

Bestrophin 2

短链L-3羟烷基脱氢酶抗体  Anti-SCHAD/HADHSC

磷酸化核糖体S6激酶RSK2抗体  Anti-Phospho-RSK2 (Ser227)

利钠肽受体C抗体  Anti-NPRC/Natriuretic Peptide Receptor C

磷酸化ZCWCC1抗体  Anti-phospho-ZCWCC1 (Ser739)

SH3结构域激酶结合蛋白1抗体

SH3KBP1

COBL蛋白抗体

Cordon bleu homolog

跨膜蛋白SEMA4A抗体  Anti-SEMA4A

孤儿核受体PAR1抗体  Anti-PXR

脑特异性多肽蛋白19抗体  Anti-PCP4/PEP-19

TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白抗体  Anti-TNIK

兔抗马IgG抗血清

核黄素转运因子3(RFT3)elisa生化检测试剂盒

RFT3 ELISA Kit

人白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)elisa生化检测试剂盒

人宫颈平滑肌细胞HumanIL-1sRⅡELISAkit

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好
，培养液是否有漏液

、浑浊等现象

，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息
，如细胞形态、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞

，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min

，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养

。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养
。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因
，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。