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细胞简介：

甲状腺是脊椎动物非常重要的腺体，属于器官
。在哺乳动物它位于颈部甲状软骨下方
，气管两旁


。人类的甲状腺形似蝴蝶。甲状腺控制使用能量的速度
、制造蛋白质、调节身体对其他荷尔蒙的敏感性
。

甲状腺有两层被膜
：气管前筋膜包绕甲状腺形成甲状腺鞘
，称为甲状腺假被膜 ;甲状腺自身的外膜伸入腺实质内
，将腺体分为若干小叶
，即纤维囊
，又称甲状腺真被膜

，这是甲状腺成纤维细胞的主要聚集场所。腺鞘与纤维囊之间的间隙内有疏松结缔组织，血管，神经和甲状旁腺等。

细胞特性：

1） 细胞来源于人正常甲状腺组织
。

2) 细胞鉴定
：纤维连接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性。

3) 经鉴定细胞纯度高于90%
。

4) 不含有 HIV-1
、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。

5) 细胞生长方式：长梭状细胞
，贴壁培养
。

推荐培养基：

242net必赢推荐使用 Delf 原代成纤维细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。

实验报告：

一
、分离与培养

：

1
、无菌条件下
，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s

，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化
；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min
，弃去上清
，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃
，5％CO2 培养箱中培养；

5
、差速贴壁1h后
，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1
、待心房肌细胞生长至80%融合时
，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2
、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3
、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min
；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗
，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

小鼠内皮抑素(ES)ELISA 试剂盒

Rat basic fibroblast growth factor 6 (bFGF-6) ELISA Kit 大鼠碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)检测试剂盒

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LIFR Protein Rat 重组大鼠 LIFR 蛋白 (His 标签)

Beta-Amyloid (31-35 0.1mgBeta-Amyloid (31-35) β淀粉样肽31-35(多肽蛋白)

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CADM3重组小鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 (His 标签) Protein

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MousesubstancePreceptor,SP-RELISAKit小鼠P物质受体(SP-R)检测试剂盒

人甲状腺成纤维细胞整合素α2β1   英文名称：   Iegrin α2β1   规格
：      英文缩写：   Iegrin α2β1

整合素α5β3   英文名称：   Iegrin α5β3   规格
：      英文缩写
：   Iegrin α5β3

β-整合素   英文名称
：   β-Iegrin   规格
：      英文缩写：   β-Iegrin

诱导型合酶   英文名称
：   induced niic oxide syhas   规格：      英文缩写：   iNOS

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好
，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基
、血清比例、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态
。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象
。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞

，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况

，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞
。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。