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细胞简介
：

毛囊是包围在毛发根部的囊状组织，内层是上皮组织性毛囊，外层是结缔组织性毛囊
，内层与表皮相连，外层则与真皮相连。其中真皮主要由成纤维细胞构成
。

细胞特性：

1）细胞来源于人头皮组织。

2)细胞鉴定
：波形蛋白 (Vimentin)荧光染色为阳性
。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV
、支原体
、、酵母和
。

5)细胞生长方式：长梭形细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

242net必赢推荐使用 delf 原代 成纤维 细胞培养体系 作为体外培养原代肠微血管内皮细胞的培养基。

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s，置37℃条件下消化10min
，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置

；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min
，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养
；

5
、差速贴壁1h后，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2
、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min

，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min

，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好
，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养
。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系

，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1
：2传代

。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿。

公司正在出售的产品：

/酵母细胞线粒体分离（高纯）试剂盒

KIAA1751蛋白抗体

KIAA1751

抗1A抗体

AVPR1A

大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体β(PPAR-B/PPARD)elisa分析检测试剂盒

酵母蛋白提取试剂盒50T

人高敏甲状腺素(u-T4)elisa分析检测试剂盒

大鼠肾上腺髓质素（AM）基因重组表达载体（pGEFP-AM）

NCK衔接蛋白1/2抗体

NCK adaptor protein 1/2

5号染色体开放阅读框48抗体

C5orf48

四分子交联体20抗体（四旋蛋白）  Anti-TSPAN20/UPIb

多效生长因子抗体  Anti-PTN/Pleiotrophin

抗细胞凋亡蛋白OLFM44抗体  Anti-OLFM4

糖皮质调节激酶1抗体  Anti-SGK1

组蛋白H3样蛋白抗体

Centromeric histone H3-like protein-1

金属离子转运体1抗体

DMT1

液泡分选蛋白4抗体  Anti-VPS4a

钠氢通道蛋白抗体  Anti-NHE1/APNH1

环指蛋白121抗体  Anti-RNF121

肿瘤坏死因子配体超家族成员15抗体  Anti-TNFSF15/TL1A

大鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)elisa分析检测试剂盒

鱼球蛋白A(IgA)elisa生化检测试剂盒

IgA ELISA kit

人补体因子I(CFI)elisa生化检测试剂盒

人毛囊成纤维细胞HumanCFIELISAKit