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细胞简介：

输卵管位于人体的盆腔内，一般的人有两条
，左、右输卵管各位于一侧
。它们由底外侧角部向外，平行伸展

，先达卵巢的端，再沿卵巢系膜缘上行至卵巢的输卵管端，且呈弓形而覆盖于卵巢上，然后向下、向内行

，终止于卵巢的游离缘及其内侧面上部。

输卵管是卵子运输
、储存
、获能
，以及卵母细胞采取、运送、成熟、受精和早期胚胎发育的重要场所。输卵管与其他空腔器官相似，其管壁由内向外为粘膜层、肌层和浆膜层所构成。其中，肌层的结构和厚度因不同节段而有差异，峡部肌层厚，管腔亦小。输卵管肌层与肌层相连

，内层的纵行肌至峡部消失。

细胞特性
：

1）细胞来源于手术切除的正常输卵管组织。

2)细胞鉴定：平滑肌肌动蛋白（α-SMA）荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1
、 HBV、HCV、支原体、
、酵母和
。

5)细胞生长方式

：梭形细胞，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基
：

242net必赢推荐使用 Delf原代平滑肌细胞培养体系 作为体外培养的培养基。

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置
，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶

，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养

；

5、差速贴壁1h后
，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养
；二
、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min

；

2
、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min

；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5
、PBS冲洗细胞3次
，每次10min，按1
：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次
，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片
，是正常现象
。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，
，用新鲜的*培养基重悬细胞
，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养

。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况
，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用
。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。

公司正在出售的产品：

缬含量测试盒

大鼠可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)elisa检测试剂盒

植物线粒体膜蛋白提取试剂盒100T

人谷受体(NMDAR)elisa分析检测试剂盒

PGL3 BASIC＋目的基因

硫酸酯酶修饰因子1抗体  Anti-SUMF1

磷脂酰乙醇胺结合蛋白1抗体  Anti-RKIP/PBP

核苷酸转氢酶抗体  Anti-NNT

胞质紧密粘连蛋白1抗体（闭锁小带蛋白1）  Anti-ZO-1

猫干扰素ω抗体 cat INF ω

末端多聚腺苷酸2蛋白抗体 OGFOD2

FBN3蛋白抗体 FBN3

FITC标记人CD62E/CD62P单克隆抗体 human CD62E/CD62P/FITC

嗅觉受体AI3重组兔单克隆抗体 ORAI3

血小板源性生长因子C抗体 PDGFC

蛋白磷酸酶亩mu抗体 PTP mu

第十七号染色体开放阅读框87抗体 C17orf87

髓易位基因相关蛋白1抗体 MTGR1

调节分化蛋白ROD1抗体 ROD1/PTBP3

Pygopus 2蛋白抗体 Pygopus 2

RAS相关GTP结合蛋白A抗体 RRAGA + RRAGB

21号染色体开放阅读框62抗体 C21ORF62

5号染色体开放阅读框24抗体 C5orf24

肌微管素相关蛋白1抗体 MTMR1

甲基转移酶NSUN5抗体 NSUN5

组织糖原磷酸化酶激酶（GLYCOGEN PHOSPHORYLASE KINASE）活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒

三碘甲状腺原(T3)elisa生化检测试剂盒

Sea Lion Triiodothyronine(T3)ELISA kit

人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)elisa生化检测试剂盒

人输卵管平滑肌细胞CCK-8ELISAKit