242net必赢

细胞简介：

DRG为躯体内脏初级感觉，富含周围神经系统感觉神经元。神经元是构成神经系统结构和功能的基本单位。神经元具有长突起，由细胞体和细胞突起构成。

细胞特性：

1）组织来源于实验动物的正常脊髓组织。

2）细胞鉴定：NSE荧光染色为阳性
。

3）经鉴定细胞纯度高于90%
。

4）不含有 HIV-1
、 HBV、HCV
、支原体、、酵母和。

5）细胞生长方式：不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基
：

242net必赢推荐使用 DELF 原代 神经元 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下
，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定
：

1

、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2
、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下

，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3
、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min
，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书
，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基
、血清比例

、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片

，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养
。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流
。由于运输的原因
，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况
，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用
。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1
：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿

。

公司正在出售的产品：

αNAGELISAKit

鸭子刺鼠相关蛋白(AGRP)elisa分析检测试剂盒

AGRP ELISA Kit

人瘢痕性天疱疮抗体(CP)elisa分析检测试剂盒

CPELISAKit

细胞GSK-3ALPHA蛋白表达比色法定量检测试剂盒

牛elisa分析检测试剂盒

顺乌头酸含量试剂盒

小鼠晶状体蛋白αB(CRYαB)elisa检测试剂盒

整合素和生长因子样蛋白1抗体

LIMS1

信号转导蛋白9复合体7b抗体

CSN7b

突触蛋白6抗体  Anti-SynaptotagminVI

多功能DNA修复酶抗体  Anti-REF1/APEX1

核蛋白易位启动子区域TPR抗体  Anti-Nucleoprotein TPR

锌指蛋白913抗体  Anti-zbtb11/ZNF913

肌动蛋白依赖染色质调控因子SMARCD3蛋白抗体

SMARCD3

黑色素瘤相关抗原B16抗体

MAGEB16

溶质载体家族蛋白21成员1C1抗体  Anti-SLCO1C1/OATP-F

磷酸化血小板源性生长因子受体α  Anti-Phospho-PDGFRA(Tyr762)

p21激活激酶2抗体  Anti-PAK2

磷酸化NF-κB活化激酶抗体  Anti-Phospho-TBK1/NAK (Ser172)

Alexa Fluor 647标记羊IgG（型对照)

大鼠CD63分子(CD63)elisa生化检测试剂盒

CD63 ELISA Kit

人高密度脂蛋白(HDL)elisa生化检测试剂盒

兔DRG神经元细胞HDLELISAKit