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细胞简介
：

血液中的单核细胞来源于骨髓干细胞分化出的髓样干细胞
，是机体防御系统的一个重要组成部分。单核细胞能吞噬异物产生抗体，在机体损伤治愈、抗御病原的入侵和对的方面起着重要的作用。机体发生炎症或其他都可引起单核细胞总数百分比发生变化
，因此检查单核细胞计数成为辅助诊断的一种重要方法。

细胞特性
：

1）组织来源于实验动物的正常外周血组织

。

2)细胞鉴定
：MO-1或MO-2荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV
、支原体、、酵母和。

5)细胞生长方式：圆形细胞，不规则细胞

，贴壁培养。

推荐培养基
：

242net必赢推荐使用 DELF 原代 巨噬 细 胞培养体系 作为体外培养的培养基
。

实验报告
：

一、分离与培养
：

1

、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清

，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置
；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液
，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化
；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min
，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶

，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养
；

5、差速贴壁1h后

，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养
；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2
、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下

，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3、PBS冲洗细胞2次

，每次10min，然后在室温条件下

，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5

、PBS冲洗细胞3次
，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次
，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象
，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息
，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片
，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决

。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞
。收到细胞后次传代建议1：2传代 
。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿。

公司正在出售的产品：

豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA 试剂盒

Rat androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 大鼠雄(ASD)检测试剂盒

Humanβ2-Glycoprotein1aibodyIgA,β2-GP1AbIgAELISAKit 人β2糖蛋白1抗体IgA(β2-GP1AbIgA)检测试剂盒 进口分装

HumanCXC-chemokinereceptor1,CXCR1检测试剂盒人CXC趋化因子受体1(CXCR1)检测试剂盒

组织ERK2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

HumanprocollagenⅢN-terminalpeptide，PⅢELISAKit人Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)检测试剂盒

DPP7重组人 DPP7 / DPPII / DPP2 蛋白 (His 标签) Protein

趋化因子C-C-基元受体3(CCR3)重组蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 3 (CCR3)

MSLN重组人 MSLN / Mesothelin 蛋白 , Biotinylated Protein

AKT1 Protein Human 重组人 AKT1 / PKB / PKBα 蛋白 (His 标签)

HA Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

趋化因子C-C-基元受体3(CCR3)重组蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 3 (CCR3)

AKT1 Protein Human 重组人 AKT1 / PKB / PKBα 蛋白 (His 标签)

DPP7重组人 DPP7 / DPPII / DPP2 蛋白 (His 标签) Protein

HA Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

MSLN重组人 MSLN / Mesothelin 蛋白 , Biotinylated Protein

猪白介素6(IL-6)ELISA 试剂盒

Human ai EB virus aibody (EBV) ELISA Kit 人抗EB病毒抗体(EBV)检测试剂盒

Porcineplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit 猪纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitforALDELISAKit大鼠固同

血液逆转录酶(REVERSEANSCREPTASE)活性荧光定量检测试剂盒20次

MouseVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit小鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)检测试剂盒

兔单核细胞中文名称   方法   规格

人葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISAKit   ELISA. 

人胰岛素原(PI)ELISAKit   ELISA. 

人胰岛素受体β(ISR-β)ELISAKit   ELISA.