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细胞简介：

股动脉是下肢动脉的主干
，由髂外动脉延续而来
。在腹股沟韧带中点的深面入股三角。在股三角内，股动脉先位于股静脉的外侧，逐渐从外侧跨到股静脉的前方
，下行入收肌管，再穿收肌腱裂孔至腘窝，易名腘动脉。

股动脉在腹股沟中点处位置表浅
，可摸到搏动，是临床上急救压迫止血和进行穿刺的部位。股动脉动脉内皮细胞组成了动脉内壁，并持续受到血流剪切应力的影响

。内皮细胞在切应力的作用下，分泌不同的内皮因子并进而影响血管收缩和生长。

主动脉内皮细胞也调节细胞黏附分子的表达来控制和精确调节炎症反应和组织纤维化。体外培养的原代股动脉内皮细胞可有效地帮助研究者研究内皮功能失调的机理，动脉粥样化等的发病机理以及发展新的方法。

细胞特性：

1）组织来源于实验动物的正常股动脉组织
。

2)细胞鉴定：血管假性血友病因子（vWF）荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%

。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和

。

5)细胞生长方式
：铺路石状细胞
，不规则细胞，贴壁培养
。

推荐培养基
：

242net必赢推荐使用 DELF 原代 内皮 细 胞培养体系 作为体外培养的培养基

。

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s
，置37℃条件下消化10min
，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液
，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5
、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1
、待心房肌细胞生长至80%融合时
，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2
、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min
；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗
，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5、PBS冲洗细胞3次
，每次10min
，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6
、用PBS冲洗3次，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书
，了解细胞相关信息
，如细胞形态、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清

。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，
，用新鲜的*培养基重悬细胞
，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养
。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和242net必赢联系
，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1

：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。

公司正在出售的产品：

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大鼠碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)elisa检测试剂盒

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人核心结合因子α1,CBFA1/RUNX2 elisa分析检测试剂盒

体外非细胞系统细胞色素P450亚酶4F3B（LEUKOTRINE B4）

体液L－乳酸比色法定量检测试剂盒

犬β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa检测试剂盒

大鼠2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)elisa分析检测试剂盒

小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)elisa检测试剂盒

衰变加速因子CD55抗体 CD55

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PE-Cy5标记小鼠CD38单克隆抗体 mouse CD38/PE-Cy5

PE标记人CD23单克隆抗体 human CD23/PE

组蛋白去乙酰化酶4重组兔单克隆抗体 HDAC4

17β羟基类固醇脱氢酶12/17β-HSD12抗体 HSD17B12

红色荧光蛋白单克隆抗体 RFP

环指蛋白62抗体 RNF62/MKRN2

锌指蛋白924抗体 ZBTB41

五肽抗体 TP-5/Thymopentin

促黄体素β亚单位重组兔单克隆抗体 LHB

蛋亚砜还原酶B2抗体 MSRB2

Endokinin-C抗体 Endokinin-C

FAM198B蛋白抗体 FAM198B

磷酸化糖原合酶激酶3α抗体 Phospho-GSK3A (Ser21)

卵黄状黄斑病蛋白4抗体 Bestrophin 4

组织SPHK激酶总活性比色法定量检测试剂盒（510）

MAPK/ERK激酶3重组兔单克隆抗体

MEKK3

1号染色体开放阅读框123抗体

兔股动脉内皮细胞C1orf123