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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层
，以利于组织块粘着于瓶壁
，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞
，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离
，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用
。

产品名称
：兔肾足细胞

英文名称
：Rabbit primary renal podocytes

组织来源：肾脏组织

产品规格

：5×105cells/T25细胞培养瓶

细胞简介：

肾小球为血液过滤器
，肾小球壁构成过滤膜。肾小球过滤膜从内到外有三层结构
：内层为内皮
、中层为肾小球基膜
、外层为上皮细胞层，上皮细胞又称足细胞，其不规则突起称足突，其间有许多狭小间隙，血液经滤膜过滤后

，滤液入肾小球囊。在正常情况下

，血液中绝大部分蛋白质不能滤过而保留于血液中，仅小分子物质如尿素
、葡萄糖、电解质及某些小分子蛋白能滤过。

肾足细胞即肾小球上皮细胞，它附着于肾小球基底膜的外侧
，连同肾小球基底膜和肾小球基膜一起构成了肾小球血液滤过屏障。又由于正常成年机体的肾脏足细胞是一种终末分化细胞
，体外培养的原代细胞不能增殖
。

足细胞呈星型多突状，胞体较大，由胞体伸出许多突起，呈指状交叉覆盖于肾小球基底膜外表面，并通过黏附分子和蛋白多糖分子与肾小球基底膜相连。

足细胞在正常情况下可以分泌肾小球基底膜的主要组成成分 IV型胶原和纤维连接蛋白,在促肾纤维化引资等刺激下还能分泌具有降解肾小球基底膜作用的基质金属蛋白酶和组织蛋白酶
，从而在肾小球基底膜的代谢平衡中发挥重要作用。

细胞特性
：

1）细胞来源于实验动物正常肾脏组织。

2)细胞鉴定：广谱角蛋白（PCK）或WT-1（Wilm'sTumorProtein）荧光染色为阳性
。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1
、 HBV
、HCV、支原体、
、酵母和。

5)细胞生长方式：不规则，含足突细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

242net必赢推荐使用 DELF 原代 肾足 细 胞培养体系 作为体外培养的培养基。

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散

，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状

，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散
，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长
。

大鼠促黄体(LH)elisa检测试剂盒

通用型DAB显色溶液

小鼠苯丙(LPA)elisa分析检测试剂盒

elisa分析检测试剂盒

非位素AP－BCIP/NBT法DNA斑点杂交试剂盒

体液D-葡萄糖激酶法定量检测试剂盒

人Tau蛋白（TAU）elisa检测试剂盒

大鼠氨基端前心钠肽(NT-ProANP)elisa检测试剂盒

小鼠松弛肽(RLN)elisa检测试剂盒

细胞分裂周期蛋白20B抗体 CDC20B

细胞球蛋白抗体 CYGB

TOMM70A蛋白抗体 TOMM70A

WDFY3蛋白抗体 WDFY3

AF750标记的软骨蛋白聚糖抗体 ADAMTS5, Alexa Fluor 750 conjugated

APC标记人CD274 (B7-H1, PD-L1)单克隆抗体 human CD274 (B7-H1, PD-L1)/APC

巨细胞病毒PP65单克隆抗体 HCMV pp65

可溶性附着蛋白β-SNAP抗体 SNAP-beta

造血干细胞特异性相关结合蛋白3抗体 HS1BP3

整合素αV（CD51）抗体 ITGAV

富含亮重复蛋白8D抗体 LRRC8D

钙粘蛋白20抗体 Cadherin 20

HLA Class II DR4抗体 HLA Class II DR4

KATNAL2蛋白抗体 KATNAL2

葡萄糖6-磷酸脱氨酶2抗体 GNPDA2

染色体及有丝分裂蛋白MIS12抗体 MIS12

细胞脂质过氧化物反式十八碳四烯酸（cis-parinaric acid）比色法测定试剂盒

大鼠CD45分子(CD45)elisa生化检测试剂盒

CD45 ELISA Kit

人高分子量脂联素(HMW Adiponectin)elisa生化检测试剂盒

兔肾足细胞HMWAdiponectinELISAKit

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁
。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用