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细胞简介：

小鼠腹腔主动脉是人体的大动脉，直接延续于发自左心室的主动脉，胸腔主动脉
，沿脊柱左侧下行，主要负责腹腔脏器和腹壁的血液供应。腹腔主动脉内皮细胞组成了主动脉内壁，并持续受到血流剪切应力的影响。

内皮细胞在切应力的作用下，分泌不同的内皮因子并进而影响血管收缩和生长。小鼠主动脉内皮细胞也调节细胞黏附分子的表达来控制和精确调节炎症反应和组织纤维化
。体外培养的原代主动脉内皮细胞可有效地帮助研究者研究内皮功能失调的机理
，动脉粥样化等的发病机理以及发展新的方法

。

细胞特性

：

1）或血管假性血友病因子（vWF）荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV

、HCV、支原体、
、酵母和。

5)细胞生长方式

：铺路石状细胞，不规则细胞
，贴壁培养。

推荐培养基：

242net必赢推荐使用 Delf原代内皮细胞培养体系 作为体外培养的培养基
。

实验报告：

一、分离与培养：

1
、无菌条件下
，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s

，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置
；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液
，混悬10s
，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置
，重复此步骤2-3次，直至组织被消化
；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min，弃去上清
，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5
、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二


、免疫荧光鉴定：

1


、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基

，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5
、PBS冲洗细胞3次
，每次10min，按1

：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次
，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品
：

PCTELISAKit

人血清抗体

human serum

gp130结合蛋白GAM抗体

AES

组织酶（glutaminase）活性比色法定量检测试剂盒

人低氧诱导因子1α(HIF-1α)elisa分析检测试剂盒

大鼠缝隙连接蛋白α1,43kDa(GJA1)elisa分析检测试剂盒

二糖酶测试盒 测乳糖酶Lactase 50管/24样 比色法

地中海热蛋白MEFV抗体

MEFV

1号染色体开放阅读框111抗体

C1ORF111

分子伴侣复合体TCP-1α抗体  Anti-TCP1 alpha

RAB3-GTP酶激活蛋白催化亚单位2抗体  Anti-RAB3GAP2

神经细胞正五聚体1抗体  Anti-NPTX1/NP1

VWCE抗体  Anti-VWCE

腱糖蛋白X抗体

TNXB

Y染色体开放阅读框15B抗体

CYorf15B

锌指转录因子Slug抗体  Anti-SNAI2/SLUG

成骨相关转录因子抗体  Anti-Osterix

核苷酸还原酶M2B抗体  Anti-p53R2/RRM2B

微管蛋白抗体（组化用抗体）Tubulin β  Anti-Tubulin-Beta

Alexa Fluor 647标记小鼠IgG（型对照)

突触结合蛋白12抗体  Anti-Synaptotagmin XII

FITC标记的小鼠抗豚鼠IgG H&L

Mouse Anti-Guinea Pig IgG H&L / FITC

小鼠腹腔主动脉内皮细胞FAM91A1蛋白抗体

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和242net必赢联系。

2. 仔细阅读细胞说明书

，了解细胞相关信息，如细胞形态

、所用培养基
、血清比例、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态
。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片
，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和242net必赢联系，告知细胞的具体情况，以便242net必赢的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用

。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞
。收到细胞后次传代建议1
：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿。